袁春华 程谟鑫 李 影 程谟国

    牡丹江医学院第二附属医院神经内二科，黑龙江牡丹江 157009

    缺血性脑血管病注重早期溶栓治疗，使局部血液供应恢复正常，但再灌注将进一步加重缺血组织的损伤。再灌注损伤主要以神经细胞凋亡为主[1-2]。研究发现磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase，PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine kinase，Akt)是促进细胞存活的重要信号通路，在脑缺血再灌注过程中能够减轻对神经细胞的损伤，促进神经元细胞存活作用[3-5]。研究发现丹参具有改善微循环、抗血栓、抗氧化、促进组织恢复等作用[6-7]。丹参对脑缺血再灌注损伤的临床疗效明确，但是否通过激活PI3K/Akt转导通路对抗脑缺血再灌注引起的神经细胞损伤尚不明确。通过动物实验研究观察丹参对脑缺血再灌注损伤神经功能和脑梗死体积影响及对脑组织中磷酸化AKT蛋白(phosphorylated Akt protein，p-AKT)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和缺氧诱导因子-1α(Hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α)表达情况，探讨丹参治疗脑缺血再灌注损伤的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及分组

    2020年3—5月，选择48只健康SD大鼠，体重为(240±10)g，由牡丹江医学院实验动物中心提供，实验前适应性饲养观察3 d。将大鼠随机分为假手术组、模型组、丹参组和LY294002组，每组12只。所有实验动物操作均符合实验动物伦理学要求。

    1.2 方法

    1.2.1 药品及试剂 LY294002(美国Sigma公司)，兔抗大鼠 p-Akt 多克隆抗体，兔抗大鼠 Caspase-3 多克隆抗体，兔抗大鼠 HIF-1α多克隆抗体(北京博奥森生物公司) ......