吴洁莹，吴韶清，陈劲松，陆 琰，汤雪薇，李 焱

    (广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心 广东 广州 510623)

    与骨髓和外周血干细胞的供者资料库不同，脐血库是将脐带血以实物形式置于液氮中长期冻存，一旦与受者匹配，可在短时间内快速解冻并回输。虽然极大提高了治疗的可及性，但是，长期冻存和复苏都会不可避免地影响脐带血的造血功能[1-3]。由于脐带血只能采集一次，数量有限，可供检测的样本更少。如何快速、准确地评价复苏后脐带血的造血功能，是脐血库质量控制、产品放行，及移植中心供体选择、风险评估等过程中都必须关注的重点[4-5]。本文探讨非离心的免疫磁珠法在检测冷冻复苏后脐带血造血功能中的应用。

    1.资料与方法

    1.1 一般资料

    选择广州脐血库2014 年11 月—2018 年1 月的76份样本(常规法组)和2018 年2 月—2020 年12 月的73份样本(新方法组)。冷冻前从脐血采集袋取样，复苏后从附属血辫取样。此阶段实验室的操作环境和仪器设备运行稳定，技术人员相对固定，数据具有可比性。

    1.2 方法

    1.2.1 主要试剂与仪器IMDM 培养基购自美国Gibco 公 司， 批 号：1843036/2150863； 胎 牛 血清 购 自 美 国Gibco 公 司，批 号：1908360C；DNA 酶(RNase-Free DNase)购自美国Promega 公司，批号：0000231528/0000335463；ErythroClearTMRed Blood Cell Depletion 试剂盒购自加拿大Stemcell 公司，批号：19C101192/1000012783；台盼蓝染液购自Sigma 公司，批号：TRB0850；甲基纤维素半固体培养基购自加拿大Stemcell 公司，批号：18M98047/1000019901；流式抗体：CD45-异硫氰酸荧光素(FITC)、CD34-藻红蛋白(PE)、免疫球蛋白(IgG)-PE、7-氨基放线菌素(AAD)及溶血素购自美国BD 公司，批号：8311690/8341967/9015 728/9134970/9029989；生物洁净工作台购自苏州苏静安泰空气技术有限公司，型号：BCM-1600A；低温高速离心机购自美国IEC 公司 ......