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编号:1527820
弱精子症与健康可育男性精子miRNA 表达谱差异分析
http://www.100md.com 2021年9月25日 医药前沿 2021年第21期
精液,测序,资料与方法,1一般资料,2实验方法,3统计学方法,结果,2RNA纯度和浓度,3基因表达丰度统计,4miRNA差异表达谱,5miRNA靶基因信息学分析,讨论
     梁高照,张国晖,李 春,汪 清(通讯作者)

    (1 深圳市宝安人民医院泌尿疾病中心 广东 深圳 518000)

    (2 广东医科大学 广东 湛江 524000)

    弱精子症(asthenozoospermia, AZS)是指精子前向运动(a 级+b 级)小于32%的病理状态,是男性不育的主要原因之一[1]。健康可育男性精子microRNA,(miRNA)是一类小的、单链的非编码RNA 分子,是基因表达中的一类调控因子。在精子发生过程中,miRNA 以细胞特异性方式表达,参与男性生殖细胞分化的每个步骤[2]。研究表明,miRNA 表达失调会导致AZS,是AZS形成的重要原因[3-5]。然而,由于实验对象、年龄、实验方法或miRNA 参考范围存在差异,各个研究中心之间关于AZS 的miRNA 的研究数据及表达谱仍然存在很大差异。鉴于miRNA 调控在AZS 发生中的重要作用及各研究中心之间关于miRNA 表达谱的参差不齐,旨在鉴定和表征AZS 不育男性和健康可育男性精子中的miRNA 表达谱,并进一步探讨miRNA 靶基因的功能聚类及控制通路,预测miRNA 在AZS 发生中的分子机制。

    1.资料与方法

    1.1 一般资料

    于2018 年12 月—2019 年11 月,选取因不孕不育到深圳市宝安区人民医院泌尿外科就诊的年轻男性。(1)AZS 不育组纳入标准:25 ~40 岁男性;精液实验室检查符合AZS 世界卫生组织(World Health Organization WHO)诊断标准:活力PR 级(a+b 级)<32%、精子浓度≥15×106/mL、正常精子形态≥4%;未育;性激素水平正常;生殖系统体格检查正常。(2)正常对照组纳入标准:25 ~40 岁男性;精液实验室检查正常:PR 级(a+b 级)≥32%、精子浓度≥15×106/mL、正常精子形态≥4%;具有健康子代。(3)排除标准:精液异常(颜色、体积、液化异常)、精浆果糖异常、α-葡糖糖苷酶异常、泌尿生殖道感染。纳入的所有男性均签署知情同意书。

    1.2 实验方法

    1.2.1 样本收集 所有男性禁欲5 d 后收集精液 ......

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