解聚素金属蛋白酶在自身免疫性关节炎中的表达及与疾病活动的相关性研究(2)
1.2 ADAM8、ADAM15、ADAM19 mRNA表达水平的检测方法 收集自身免疫性关节炎患者及健康对照组基础信息，包括临床资料及红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、类风湿因子(RF)及抗CCP抗体水平。采集自身免疫性关节炎患者及健康对照组外周血单个核细胞，采用ficoll梯度离心的方法分离各组外周血单个核细胞，将分离的研究者外周单个核细胞使用PBS清洗后加入1 mL Trizol试剂(Gibco公司)，混匀，静置5 min；加氯仿200 μL静置
5 min，12 000 r·min-1离心机离心15 min；然后取上清加入500 μL异丙醇，静置10 min，12 000 r·min-1离心机离心10 min，弃去上清；750 mL·L-1乙醇洗涤离心弃去上清，干燥沉淀5～10 min，溶解总RNA于DEPC水。使用反转录试剂盒(PrimeScript，TAKARA)进行cDNA反转录，将反转录用的引物 ......
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5 min，12 000 r·min-1离心机离心15 min；然后取上清加入500 μL异丙醇，静置10 min，12 000 r·min-1离心机离心10 min，弃去上清；750 mL·L-1乙醇洗涤离心弃去上清，干燥沉淀5～10 min，溶解总RNA于DEPC水。使用反转录试剂盒(PrimeScript，TAKARA)进行cDNA反转录，将反转录用的引物 ......
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