长非编码RNA MT1JP调控p53抑制类风湿关节炎炎症反应作用及机制研究(2)

http://www.100md.com 2017年10月1日 《风湿病与关节炎》2017年第10期

     1.1 标本收集 选取本院的RA患者35例和骨关节置换患者(选取车祸等各种原因导致粉粹性骨折的患者)35例。收集患者的临床资料、滑膜组织、血清。滑膜组织采用无菌收集，手术后取关节滑膜组织于干净无菌的50 mL离心管中，置于冰上。然后于无菌操作台剥除脂肪组织、骨头、血管等。收集到的滑膜组织用生理盐水洗3遍，无菌管冻存于液氮罐中，用于后续实验研究。所有患者资料和标本收集均严格按照广州医科大学伦理委员会相关规定。

    1.2 试剂和仪器 IL-6、IL-8、IL-1β ELISA检测试剂盒(BD公司)；SYBER Green试剂盒(Takara公司)；MT1JP小分子干扰片段(锐博公司)；转染试剂Lipo2000(Invtrogen公司)；细胞培养液(Hyclone公司)；细胞培养皿(康宁公司)；p53抗体(CST公司)；电泳电转仪、凝胶成像系统(伯乐公司)；离心机(eppendorf)；pH计(上海佑仪公司)；荧光PCR仪(ABI公司)。

    2 方 法

    2.1 细胞培养 MH7A细胞为RA滑膜细胞 ......