许 佳，于成功

    (南京中医药大学中西医结合鼓楼临床学院，江苏 南京 210008)

    炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一种以持续的肠黏膜损害和增殖性炎症改变为特点的疾病，致纤维化因子分泌增加刺激细胞不断增殖、分化，导致胶原沉积在肠壁上而发生纤维化。中药溃克灵对结肠炎模型大鼠有一定的预防和保护作用[1],已于临床应用，治疗IBD效果显著。本研究通过建立TNBS诱发的实验性结肠炎大鼠模型,观察溃克灵加减方对结肠炎模型大鼠肠道胶原沉积的影响,初步探讨其抗IBD肠壁纤维化的可能机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 SD大鼠40只，雄性，6～8周龄，体质量(180±20)g，购自南京江宁区青龙山动物繁殖场，饲养于南京鼓楼医院动物模式中心二级动物房。

    1.2 药品和试剂 药品:KKL由猴头菌、半枝莲、败酱草、马齿苋、白芍、槐花、厚朴、土茯苓等按特定剂量比例组成,为南京市鼓楼医院消化科课题组原创组方,MKKL加减方由原方减去马齿苋、土茯苓、半枝莲等药味，加入丹参、九香虫和炙甘草化裁而来。中药制剂购自江阴天江药业有限公司，95 ℃水浴浓缩(KKL中使每毫升含原药材0.667 g,MKKL中使每毫升含原药材0.608 g)。药物制成后，高压灭菌消毒分装，4 ℃冰箱保存备用。TNBS(产品编号：P2297)购自美国Sigma公司。试剂：Masson三色染色试剂盒购于南京凯基生物科技有限公司(产品编号：KGMST-8003)，兔抗大鼠IGF-1多克隆抗体、兔抗大鼠TGF-β1多克隆抗体和山羊抗大鼠CTGF多克隆抗体购自Santa Cruz公司(产品编号分别为SC-9013、SC-146和SC-14939)。IGF-1(PV-9001)、TGF-β1(PV-9001)兔超敏二步法免疫组化检测试剂盒和CTGF(PV-9003)山羊超敏二步法免疫组化检测试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 造模 40只大鼠在SPF级环境下适应性喂养1周,观察大鼠进食、饮水、活动、大小便情况，确定大鼠健康后,全部大鼠禁食不禁水48 h ......