艾灸对FCA诱导的AA模型大鼠心肌超微结构及血清代谢组学的影响
甲酚,丙氨酸,1材料与方法,2结果,3讨论
朱 艳,俞红五,潘喻珍,杨 佳,吴炳坤,胡 雪,曹云燕(安徽中医药大学第二附属医院老年病科,合肥 230061)
类风湿关节炎(RA)是一种可以影响全身的自身免疫性疾病,病变不仅引起关节炎症,还可引起肺、心等重要脏器的损伤,其中RA造成的心血管系统损伤为正常人群的3~4倍,甚至有人提出RA和糖尿病一样可作为心血管疾病的独立危险因素[1-3]。艾灸作为祖国医学中最为常用的外治方法,可以温经通络、活血化瘀,以改善全身及局部的血液循环,促进机体的新陈代谢,从而扶正祛邪,有效的治疗疾病[4]。本研究通过代谢组学方法寻找艾灸调节RA的标志性代谢产物及其代谢通路,以明确相关物质的变化趋势,初步探索艾灸干预RA作用机制,为RA治疗提供一定的实验依据。
1 材料与方法
1.1 动物 清洁级Wistar雄性大鼠80只,体质量(180±30)g,鼠龄5~6月,由南京生物医药研究院提供,动物合格证号:SCXF(苏)2015-0001。实验室保持恒定的温度和湿度,大鼠在明暗时间为12/12 h(明期7:00~19:00)条件下进行饲养。本实验通过动物伦理委员会批准。
1.2 仪器、试剂及药品 FCA购自美国SIGMA公司;TPT:10 mg/片,上海复旦复华药业有限公司;特制香烟型纯艾条(直径1 cm,南阳市卧龙汉医艾绒厂)。仪器:美国安捷伦公司GC/MS,型号为7890A/5975C。
1.3 造模方法 采用风、寒、湿环境因素+生物因子复合造模方法[4]复制AA模型。所有除了NC组以外的大鼠均放入造模环境中20 d。于第21天在大鼠右后足跖部注射FCA 0.5 mL/只,致炎,以建立AA模型。然后观察3 d,其中以24 h后见足踝部急性炎性肿胀,以48 h见对侧肢体或前肢,甚至尾部、耳朵炎性结节或红肿出现示造模成功。
1.4 分组及治疗 将大鼠分为NC组20只,造模成功的大鼠按随机数字表随机分为MC 20只、TPT组20只和艾灸组20只。艾灸组:参照文献[5]选取肾俞、足三里穴,按照大鼠穴位图谱定位穴区,剪去各穴位置区域的被毛,标记为红色。造模成功3 d后,予艾条在距穴位2 cm处悬灸;治疗时,1次/d,选1穴,2穴交替使用,20 min/次,连续治疗15 d。TPT组:以TPT溶液灌胃,按照8 mg/(kg·d)剂量,1次/d,共15 d[6]。NC组和MC组:予以生理盐水灌胃。
1.5 检测指标及方法 1)关节肿胀度测量[5]:分别在造模前1 d、造模后3 d、最后1次治疗24 h量取各组每只大鼠的右侧后足跖的容积 ......
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