1.2 方法

    1.2.1 细胞培养

    将HCAEC种植于含4mLECM完全培养基的25 cm2培养瓶内，置于培养箱内培养，培养条件为37℃、5%CO2，新植入的冠脉内皮细胞隔天换液，视生长情况以后48～72 h换液，待培养瓶中细胞生长至90%密度左右即可传代。

    1.2.2 实验分组

    将HCAEC分为以下4组：空白对照组(Con组)、KLA组(0.01 mg/L)、LY组(2.5 ?M)、LY+KLA组(LY2.5 ?M+KLA0.01 mg/L)。

    1.3 RT-PCR法检测

    采用PCR法检测各组HCAEC中TLR4、PI3K、Cx43的mRNA表达水平，应用ABI Prism 7500序列检测系统进行PCR反应。以各组GADPH扩增产物为内参照，用2△△CT法计算各组TLR4、PI3K、Cx43 mRNA相对表达量 ......