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编号:12973535
射干抗细菌粘附成分的活性跟踪分离
http://www.100md.com 2014年3月1日 王召贺等
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     【摘要】 分离和鉴定了射干的抗细菌粘附成分。用细菌成膜实验和细菌粘附实验验证射干存在抗细菌粘附的作用。通过活性跟踪,用硅胶柱层析的方法从射干分离了抗细菌粘附的化合物,并用氢谱结合质谱鉴定其结构,证实射干抑制细菌粘附的活性成分是鸢尾苷元,鸢尾苷元抑制细菌粘附有效的最小浓度为50ug/mL。

    【关键词】 射干;抗细菌粘附;色谱分离;活性成分

    【中图分类号】R284 【文献标识码】A 【文章编号】1005-0019(2014)03-0029-01

    随着抗菌药物在临床中的广泛应用,一些已经适应了抗菌药物的耐药细菌随之增多,这给人类健康带来了严峻挑战[1]。细菌感染的关键步骤之一是病原菌粘附到宿主正常细胞表面。细菌想要粘附到宿主细胞上,粘附素起着至关重要的作用,因此,细菌粘附是感染致病的前提。细菌通过粘附素定植在敏感细胞上, 然后在局部产生毒素或侵入深部组织致病[2]。为解决细菌的耐药性问题,一种新的抗菌药物研发思路逐渐形成,即研究以抑制细菌毒力因子或阻断细菌与宿主细胞的联系为作用机制的新型抗菌药物[3]。我们认为降低细菌对宿主细胞的粘附性,阻断细菌粘附过程可以有效控制细菌感染。本实验通过活性跟踪,用硅胶柱层析的方法在射干中分离了一个抗细菌粘附的化合物,通过氢谱结合质谱鉴定为鸢尾苷元。本文主要报道该化合物的提取、分离、结构鉴定和抗细菌粘附的研究结果。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验菌株:

    大肠杆菌分离自临床病人,酵母菌为面包酵母,枯草芽孢杆菌分离自土壤。

    1.1.2 主要药品与试剂:

    蛋白胨,纯化琼脂粉,均为上海博微生物科技有限公司产品;氯化钠(NaCl),天津市恒兴化学试剂制造有限公司产品;牛肉浸膏,北京双旋微生物培养基制品厂产品;柱层析用硅胶,青岛海浪硅胶干燥剂厂产品。

    1.1.3 培养基

    细菌培养液:蛋白胨10g,氯化钠5g,牛肉膏3g,加水1L,pH7.4~7.6。

    细菌固体培养基:蛋白胨10g ......

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