IVF与不同来源精子ICSI临床结局分析
【中图分类号】R711.6 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851(2017)09-0-01
1 资料与方法
1.1 研究对象 所有患者均来自2014年1月至2017年3月就诊于我中心，并接受辅助生殖技术(assisted reproductive technology，ART)助孕共计1328例，其中接受体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer，IVF)998例，卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection，ICSI)244例，无精子症并接受睾丸抽吸取精术(Testicular sperm aspiration，TESA)后行ICSI助孕86例。将上述患者分为IVF组，ICSI组及TESA组。对三组患者的男方及女方平均年龄、不育年限、异常染色体核型比例、在ART过程中的平均胚胎数、优质胚胎数、取消周期比例、无可移植胚胎比例、妊娠率、胚胎停育比例进行对比及统计学分析。
1.2 研究方法
1.2.1 染色体核型分析 根据《人类染色体方法学》[1]G显带染色体核型分析。
1.2.2 睾丸抽吸取精术 患者取仰卧位，术区常规消毒，1%利多卡因精索阻滞麻醉，7号头皮针头接30mL注射器刺入睾丸实质，助手持续负压抽吸，缓慢退出针头，睾丸曲细精管将随针头带出，剪下，捣碎，在显微镜下寻找精子，如没有发现精子，则可行多点穿刺。
1.2.3 优质胚胎标准 按胚胎卵裂球细胞数量均匀程度、胞质清晰度有无颗粒及碎片率将胚胎分为4级[2]。其中Ⅰ级胚胎和Ⅱ级胚胎为优质胚胎。
1.2.4 妊娠判断 移植后第14天行尿尿孕试阳性者即为妊娠，在移植后28天行B超检查，发现孕囊者为临床妊娠。
1.2.5 统计学分析 各组间年龄、不育年限、平均胚胎数、优质胚胎数均以均数±标准差(±s)表示，两组间行t检验分析，异常染色体核型比例、取消周期比例、无可移植胚胎比例、妊娠率及胚胎停育比例用检验。P<0.05差异有统计学意义。
2 结果
IVF组不有年限为4.51±3.31年，ICSI组不育年限为4.81±3.39年，TESA组不育年限为4.75±2.73年，三组之间统计学无差异。三组间女方平均年龄分别为30±4.24岁，28±1.41岁，23.5±3.54岁，男方平均年龄分别为31.5±2.12岁，31.5±2.12岁，26±7.07岁。其中IVF组的男女双方的平均年龄最大，TESA组的平均年龄最小，三组间统计学差异有显著性。见表1。
三组间异常染色体核型共计129例，占所有研究对象的9.71%。其中IVF组89例，ICSI组22例，TESA组18例，分别占本组总数的8.92%，9.02%，20.93%。其中TESA组比例最高，与IVF组及ICSI组比较统计学差异有显著性。见表2。
平均胚胎数IVF组17.0±11.3个，ICSI组11.5±4.95个，TESA组6.5±0.71个，平均优质胚胎数IVF
11.0±4.24个，ICSI组5.5±3.54个，3.0±1.4个。IVF组平均胚胎数及平均优质胚胎数均多于其他两组，相比较统计学差异有显著性。见表3。
三组中共取消周期69例，均为没有取到卵子而取消周期，其中IVF组61例，占同组总数的6.11%，ICSI组4例，占同组总数的1.64%，TESA组4例，占同组总数的4.。65%，统计学分析IVF组与ICSI组比较差异有显著性。三组中无可移植胚胎患者共计108例，其中IVF组77例，ICSI组22例，TESA组9例，分别占本组的7.72%，9.02%，10.47%，三组间统计学差异无显著性。见表4。
在所有研究对象中，接受新鲜胚胎移植者共计772例，其中IVF组555例，ICSI组75例，TESA组49例，妊娠率分别为45.05%(250/555)， 44.64%(75/168)，51.02(25/49)，三组间统计学差异无显著性。在共计临床妊娠患者中发生胚胎停育者工45例，占所有妊娠的12.86%，三组间胚胎停育比例分别为13.20%(33/250)，14.67(11/75)，2.04%(1/25)，三组间统计学差异无显著性。见表5。
3 讨论
本研目的旨在探讨体外受精-胚胎移植、ICSI及TESA-ICSI之间的临床结局的异同。经研究发现，IVF组的男女雙方年龄均大于ICSI组及TESA-ICSI组，而异常染色体核型比例TESA-ICSI组最高，平均胚胎数及平均优质胚胎数IVF组最多。周期取消比例IVF组亦最高。妊娠率TESA组最高，胚胎停止发育比例ICSI组最高，但均无统计学意义。
在三组中TESA组异常染色体核型比例最高，且与IVF组及ICSI组比较均有统计学差异。所以，本研究结果提示染色体核型异常与无精子症发生有相关性。在异常染色体核型中，Y染色体的长度异常时最常见的类型。既Y染色体的长度较22常染色体短，称为小Y染色体，Y染色体长度较18号染色体长，则称为大Y 染色体。在小Y染色体中同时伴有AZF缺失的占 %。AZF缺失包括AZFc缺失、AZFb缺失、AZFa缺失及AZFd缺失。不同类型的缺失，表现为不同的临床表现。AZFc缺失在临床中最为常见的AZF缺失类型，占 %。其临床表现从精液分析结果正常、少精子症、无精子症、弱精子症等多种临床表型。但无论在临床中那种表型，在随着时间推移，其精子含量将会逐步减少。因此，对于AZFc缺失的不育患者，应尽快行辅助生殖技术助孕。AZFa、AZFb、AZFd缺失的患者，往往会表现为无精子症，而且行睾丸抽吸取精术也无法找到精子。大Y染色体是因为Y染色体长臂异染色质DNA过多重复所致[3]，但其临床效应目前尚无定论，有研究[4]认为大Y染色体与不良妊娠结局相关，但在本研究中三组间胚胎停育的比例无统计学差异。
在ART过程中取消周期最常见的原因为卵巢低反应[5]。另外取消周期的原因有生殖道感染，卵巢囊肿以及个人及家庭原因等。在本研究中周期取消比例最高的为IVF组。分析其原因可能与ICSI组、TESA组样本量小相关。
对于不育患者治疗的最终目的是为了让其拥有自己血清学子代，在本研究中三组间妊娠率无统计学差异。因此，对于不育患者，根据其精子质量选择相应的辅助生殖技术助孕是治疗男性不育的有效方法。
参考文献
Wettasinghe TK，Jayasekara RW，Dissanayke WH.Y chromosome microdeletions Are not associated with spontaneous recurrent pregnancy loss in a Sinhalese population in Sri Lanka .Hum Reprod，2010，25(12)：3152-3156.
Dennis SJ，Thomas MA，Williams DB，et al.Embryo morphology score on day 3 is predictive of implantation and live birth rates.J Assist Reprod Genet，2006，23(4)：201-204.
张 明，孟和宝力高，高智文，等.大Y染色体对男性生育的影响.中国优生.
与遗传杂志，2013，21(4)：61-68.
5 Patricia B，Maria S，Carole AS，et al Divergent out comes of Intrachromosomal recombination on the human Y chromosome male infertility and recurrent polymorphism .J Med Genent，2000，37：752-758.
钟依平，齐诠，周灿权，等. 体外受精-胚胎移植治疗中取消周期原因分析.2007，28(3S)：69-71., http://www.100md.com(李斌业 吕金春 张永田 纪冰 马荣花)
1 资料与方法
1.1 研究对象 所有患者均来自2014年1月至2017年3月就诊于我中心，并接受辅助生殖技术(assisted reproductive technology，ART)助孕共计1328例，其中接受体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer，IVF)998例，卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection，ICSI)244例，无精子症并接受睾丸抽吸取精术(Testicular sperm aspiration，TESA)后行ICSI助孕86例。将上述患者分为IVF组，ICSI组及TESA组。对三组患者的男方及女方平均年龄、不育年限、异常染色体核型比例、在ART过程中的平均胚胎数、优质胚胎数、取消周期比例、无可移植胚胎比例、妊娠率、胚胎停育比例进行对比及统计学分析。
1.2 研究方法
1.2.1 染色体核型分析 根据《人类染色体方法学》[1]G显带染色体核型分析。
1.2.2 睾丸抽吸取精术 患者取仰卧位，术区常规消毒，1%利多卡因精索阻滞麻醉，7号头皮针头接30mL注射器刺入睾丸实质，助手持续负压抽吸，缓慢退出针头，睾丸曲细精管将随针头带出，剪下，捣碎，在显微镜下寻找精子，如没有发现精子，则可行多点穿刺。
1.2.3 优质胚胎标准 按胚胎卵裂球细胞数量均匀程度、胞质清晰度有无颗粒及碎片率将胚胎分为4级[2]。其中Ⅰ级胚胎和Ⅱ级胚胎为优质胚胎。
1.2.4 妊娠判断 移植后第14天行尿尿孕试阳性者即为妊娠，在移植后28天行B超检查，发现孕囊者为临床妊娠。
1.2.5 统计学分析 各组间年龄、不育年限、平均胚胎数、优质胚胎数均以均数±标准差(±s)表示，两组间行t检验分析，异常染色体核型比例、取消周期比例、无可移植胚胎比例、妊娠率及胚胎停育比例用检验。P<0.05差异有统计学意义。
2 结果
IVF组不有年限为4.51±3.31年，ICSI组不育年限为4.81±3.39年，TESA组不育年限为4.75±2.73年，三组之间统计学无差异。三组间女方平均年龄分别为30±4.24岁，28±1.41岁，23.5±3.54岁，男方平均年龄分别为31.5±2.12岁，31.5±2.12岁，26±7.07岁。其中IVF组的男女双方的平均年龄最大，TESA组的平均年龄最小，三组间统计学差异有显著性。见表1。
三组间异常染色体核型共计129例，占所有研究对象的9.71%。其中IVF组89例，ICSI组22例，TESA组18例，分别占本组总数的8.92%，9.02%，20.93%。其中TESA组比例最高，与IVF组及ICSI组比较统计学差异有显著性。见表2。
平均胚胎数IVF组17.0±11.3个，ICSI组11.5±4.95个，TESA组6.5±0.71个，平均优质胚胎数IVF
11.0±4.24个，ICSI组5.5±3.54个，3.0±1.4个。IVF组平均胚胎数及平均优质胚胎数均多于其他两组，相比较统计学差异有显著性。见表3。
三组中共取消周期69例，均为没有取到卵子而取消周期，其中IVF组61例，占同组总数的6.11%，ICSI组4例，占同组总数的1.64%，TESA组4例，占同组总数的4.。65%，统计学分析IVF组与ICSI组比较差异有显著性。三组中无可移植胚胎患者共计108例，其中IVF组77例，ICSI组22例，TESA组9例，分别占本组的7.72%，9.02%，10.47%，三组间统计学差异无显著性。见表4。
在所有研究对象中，接受新鲜胚胎移植者共计772例，其中IVF组555例，ICSI组75例，TESA组49例，妊娠率分别为45.05%(250/555)， 44.64%(75/168)，51.02(25/49)，三组间统计学差异无显著性。在共计临床妊娠患者中发生胚胎停育者工45例，占所有妊娠的12.86%，三组间胚胎停育比例分别为13.20%(33/250)，14.67(11/75)，2.04%(1/25)，三组间统计学差异无显著性。见表5。
3 讨论
本研目的旨在探讨体外受精-胚胎移植、ICSI及TESA-ICSI之间的临床结局的异同。经研究发现，IVF组的男女雙方年龄均大于ICSI组及TESA-ICSI组，而异常染色体核型比例TESA-ICSI组最高，平均胚胎数及平均优质胚胎数IVF组最多。周期取消比例IVF组亦最高。妊娠率TESA组最高，胚胎停止发育比例ICSI组最高，但均无统计学意义。
在三组中TESA组异常染色体核型比例最高，且与IVF组及ICSI组比较均有统计学差异。所以，本研究结果提示染色体核型异常与无精子症发生有相关性。在异常染色体核型中，Y染色体的长度异常时最常见的类型。既Y染色体的长度较22常染色体短，称为小Y染色体，Y染色体长度较18号染色体长，则称为大Y 染色体。在小Y染色体中同时伴有AZF缺失的占 %。AZF缺失包括AZFc缺失、AZFb缺失、AZFa缺失及AZFd缺失。不同类型的缺失，表现为不同的临床表现。AZFc缺失在临床中最为常见的AZF缺失类型，占 %。其临床表现从精液分析结果正常、少精子症、无精子症、弱精子症等多种临床表型。但无论在临床中那种表型，在随着时间推移，其精子含量将会逐步减少。因此，对于AZFc缺失的不育患者，应尽快行辅助生殖技术助孕。AZFa、AZFb、AZFd缺失的患者，往往会表现为无精子症，而且行睾丸抽吸取精术也无法找到精子。大Y染色体是因为Y染色体长臂异染色质DNA过多重复所致[3]，但其临床效应目前尚无定论，有研究[4]认为大Y染色体与不良妊娠结局相关，但在本研究中三组间胚胎停育的比例无统计学差异。
在ART过程中取消周期最常见的原因为卵巢低反应[5]。另外取消周期的原因有生殖道感染，卵巢囊肿以及个人及家庭原因等。在本研究中周期取消比例最高的为IVF组。分析其原因可能与ICSI组、TESA组样本量小相关。
对于不育患者治疗的最终目的是为了让其拥有自己血清学子代，在本研究中三组间妊娠率无统计学差异。因此，对于不育患者，根据其精子质量选择相应的辅助生殖技术助孕是治疗男性不育的有效方法。
参考文献
Wettasinghe TK，Jayasekara RW，Dissanayke WH.Y chromosome microdeletions Are not associated with spontaneous recurrent pregnancy loss in a Sinhalese population in Sri Lanka .Hum Reprod，2010，25(12)：3152-3156.
Dennis SJ，Thomas MA，Williams DB，et al.Embryo morphology score on day 3 is predictive of implantation and live birth rates.J Assist Reprod Genet，2006，23(4)：201-204.
张 明，孟和宝力高，高智文，等.大Y染色体对男性生育的影响.中国优生.
与遗传杂志，2013，21(4)：61-68.
5 Patricia B，Maria S，Carole AS，et al Divergent out comes of Intrachromosomal recombination on the human Y chromosome male infertility and recurrent polymorphism .J Med Genent，2000，37：752-758.
钟依平，齐诠，周灿权，等. 体外受精-胚胎移植治疗中取消周期原因分析.2007，28(3S)：69-71., http://www.100md.com(李斌业 吕金春 张永田 纪冰 马荣花)