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编号:13105251
ELISA方法在献血者血液检测中的应用及注意事项
http://www.100md.com 2017年10月1日 《特别健康·下半月》 2017年第10期
     【中图分类号】R446.1 【文献标识码】B 【文章编号】2095-6851(2017)10--01

    血液质量是当前输血管理工作中一项重要课题。为了保证血液质量,确保临床输血安全有效,遏制经血传播疾病的发生,卫生主管部门规定各采供血机构,应分别对献血者采用ELISA法进行HBs—Ag、抗一HCV、抗一HIV、TP等各项指标的检测,并制定了各种质量标准、操作规程和技术规范。

    酶联免疫吸附试验(ELISA)具有敏感性高、特异性强、操作简便等优点,是目前采供血机构对献血者血液标本进行安全性指标检测主要的方法。近年来,各种自动化检测仪器设备在血站检验科得到了普遍应用,人员素质及检测试剂质量不断提高,检验质量得到了充分保证。但仍有一些困扰实验室人员的问题需要注意及解决,现探讨如下。

    1 ELISA的基本原理

    ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合的一种具有高特异性和高敏感性的实验技术,几乎所有的可溶性抗原一抗体系统均可用以检测,它的最小可测值达ng甚至pg水平。该方法的基本原理如下:(1)将抗原或抗体结合到某种固相载体(目前以聚苯乙烯微量滴定板最为常用)表面,并保持其免疫活性。此步骤称为“固相载体的包被”,在商品化试剂盒中均已完成。(2)再将抗原或抗体与某种酶(如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等)连接成酶标抗原或酶标抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。检测时,按相应顺序加入待检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或酶标抗体,使其与固相载体上的抗原或抗体发生反应。以洗涤的方法洗去各步骤中过量的未结合物质 ......

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