硫酸软骨素眼用膜剂含量测定方法的建立及质量研究(2)
2.2.7 标准曲线的绘制
分别吸取硫酸软骨素溶液010mL、020mL、030mL、040mL、050mL、060mL、070mL，按最佳水解条件测定硫酸软骨素水解液吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，进行直线回归，得回归方程为：y=04520x+01210(R2=09995)，线性关系良好。
2.2.8 精密度
吸取硫酸软骨素溶液020mL，按按最佳水解条件测定硫酸软骨素水解液吸光度，每隔两小时测定一次，连续测定5次作为日内精密度;同法连续测定5天作为日间精密度。结果日内精密度良好，RSD<1%;日间精密度不佳，RSD接近5%，故本法應当天样品当天测定。
2.3 眼用膜剂的质量研究
2.3.1 性状、pH、重量差异及含药量测定
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将21项下制得眼用膜剂按《中国药典》(2015版)第四部膜剂项下，考察膜剂的性状、重量差异[2]。另取10片，溶于05mL纯化水中，玻璃棒沾取少量溶液，润湿精密pH试纸，与标准比色卡对比，测其pH。按所建立间苯三酚显色法测定每片平均含药量。结果制得的眼用膜剂无色透明、柔韧性良好、平整无泡、厚度适宜。单片片重范围为316～428mg，超出重量差异限度的有一片，无超出限度一倍的膜片，符合药典规定;pH70。含药量为0474mg/片
2.3.2 释放度
按《中国药典》(2015版)释放度测定方法第三法小杯法，于第5min，15min，30min，2h，4h分别取样5mL，同时补充同等体积的释放介质，立即用微孔滤膜滤过，自取样至滤过应在30秒内完成[3]。吸取02mL澄清滤液按含量测定方法于5445nm处测定硫酸软骨素吸光度，计算浓度及累积释放度，绘制累积释放曲线。结果显示15min释放不足30%，至2h时接近完全释放。由此预测该眼用膜剂较滴眼剂能有效延长药物于眼部的作用时间。
, 百拇医药
2.3.3 刺激性
选用健康、无眼疾的家兔，采用左右侧自身对比的方法进行硫酸软骨素眼用膜剂的单次给药刺激性试验，左眼给药，右眼为空白对照。于给药后1h，2h，4h，6h，24h，48h，72h后至7天观察角膜、结膜、虹膜的受损状况即眼局部的情况。按照卫生部《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》眼部刺激性试验反应评分表进行评分(该方法为Draize试验改良的试验方法)。在此评分系统中，对角膜受损的强度以及面积进行评分，为0～4分。对虹膜进行相关规定评分，为0～2分。对结膜发炎、水肿、分泌物打分，分别是0～3分，0～4分，和0～3分。刺激性严重程度以刺激性最大的家兔为准。按照评分标准得出的评分结果为2分，刺激性较低。
2.3.4 高温、高湿试验
取眼用膜剂150片置于表面皿上，开口，40℃温度下放置10天，于第五天和第十天取样，每次取样量为50片，考察其外观，含药量，pH，与第0天进行比较。取眼用膜剂150片于表面皿上，在25℃相对湿度75%条件下放置10天，于第五天和第十天取样，每次取样量为50片，按高温试验同法进行考察。结果显示高温条件下10天后样品色泽变为黄色，pH无明显变化，含药量增加;高湿条件下10天后样品色泽无明显变化，pH无明显变化，含药量增加。分析硫酸软骨素可能在高温、高湿条件下降解为在其最大吸收波长处有吸收的有关物质。
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3 讨论
硫酸软骨素眼用膜剂在高温高湿均条件下均不稳定，可能分解为未知的有关物质，有关物质的具体成分还有待考察。故该眼用膜剂应该在阴凉干燥处保存，以免发生降解、变质影响治疗效果。由于该膜剂为眼用制剂，所以对它的刺激性评价尤为关键，在厚度、柔韧性等方面也有着严格要求，避免对眼部造成刺激。膜剂的性状评价无准确标准，会因实验人员的不同而产生较大差异，评价结果有着很强的主观因素，会随着评分人员的不同而产生变化。由于制备者的不同，或者批次的不同对其含量，厚度等方面都会产生影响，因此其质量不可控因素较多。
参考文献：
[1] 张华珺，陈敏，李慧，等. 硫酸软骨素间苯三酚光度分析法的改进研究[J]. 食品研究与开发，2006， 27(7)： 163-168
[2] 连晓佳，多种换孢菌素A眼用制剂稳定性， 结膜刺激性IL-6水平影响的研究[D]. 天津： 天津医科大学， 2014： 6-7
[3] 李沙，李晓飞，刘娟，等.紫草膜剂的制备及左旋紫草素的含量测定[J]， 中国医院药学杂志， 2011， 31(12)：962-963, 百拇医药(崔颖 陈继成 陈红艳)
分别吸取硫酸软骨素溶液010mL、020mL、030mL、040mL、050mL、060mL、070mL，按最佳水解条件测定硫酸软骨素水解液吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，进行直线回归，得回归方程为：y=04520x+01210(R2=09995)，线性关系良好。
2.2.8 精密度
吸取硫酸软骨素溶液020mL，按按最佳水解条件测定硫酸软骨素水解液吸光度，每隔两小时测定一次，连续测定5次作为日内精密度;同法连续测定5天作为日间精密度。结果日内精密度良好，RSD<1%;日间精密度不佳，RSD接近5%，故本法應当天样品当天测定。
2.3 眼用膜剂的质量研究
2.3.1 性状、pH、重量差异及含药量测定
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将21项下制得眼用膜剂按《中国药典》(2015版)第四部膜剂项下，考察膜剂的性状、重量差异[2]。另取10片，溶于05mL纯化水中，玻璃棒沾取少量溶液，润湿精密pH试纸，与标准比色卡对比，测其pH。按所建立间苯三酚显色法测定每片平均含药量。结果制得的眼用膜剂无色透明、柔韧性良好、平整无泡、厚度适宜。单片片重范围为316～428mg，超出重量差异限度的有一片，无超出限度一倍的膜片，符合药典规定;pH70。含药量为0474mg/片
2.3.2 释放度
按《中国药典》(2015版)释放度测定方法第三法小杯法，于第5min，15min，30min，2h，4h分别取样5mL，同时补充同等体积的释放介质，立即用微孔滤膜滤过，自取样至滤过应在30秒内完成[3]。吸取02mL澄清滤液按含量测定方法于5445nm处测定硫酸软骨素吸光度，计算浓度及累积释放度，绘制累积释放曲线。结果显示15min释放不足30%，至2h时接近完全释放。由此预测该眼用膜剂较滴眼剂能有效延长药物于眼部的作用时间。
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2.3.3 刺激性
选用健康、无眼疾的家兔，采用左右侧自身对比的方法进行硫酸软骨素眼用膜剂的单次给药刺激性试验，左眼给药，右眼为空白对照。于给药后1h，2h，4h，6h，24h，48h，72h后至7天观察角膜、结膜、虹膜的受损状况即眼局部的情况。按照卫生部《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》眼部刺激性试验反应评分表进行评分(该方法为Draize试验改良的试验方法)。在此评分系统中，对角膜受损的强度以及面积进行评分，为0～4分。对虹膜进行相关规定评分，为0～2分。对结膜发炎、水肿、分泌物打分，分别是0～3分，0～4分，和0～3分。刺激性严重程度以刺激性最大的家兔为准。按照评分标准得出的评分结果为2分，刺激性较低。
2.3.4 高温、高湿试验
取眼用膜剂150片置于表面皿上，开口，40℃温度下放置10天，于第五天和第十天取样，每次取样量为50片，考察其外观，含药量，pH，与第0天进行比较。取眼用膜剂150片于表面皿上，在25℃相对湿度75%条件下放置10天，于第五天和第十天取样，每次取样量为50片，按高温试验同法进行考察。结果显示高温条件下10天后样品色泽变为黄色，pH无明显变化，含药量增加;高湿条件下10天后样品色泽无明显变化，pH无明显变化，含药量增加。分析硫酸软骨素可能在高温、高湿条件下降解为在其最大吸收波长处有吸收的有关物质。
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3 讨论
硫酸软骨素眼用膜剂在高温高湿均条件下均不稳定，可能分解为未知的有关物质，有关物质的具体成分还有待考察。故该眼用膜剂应该在阴凉干燥处保存，以免发生降解、变质影响治疗效果。由于该膜剂为眼用制剂，所以对它的刺激性评价尤为关键，在厚度、柔韧性等方面也有着严格要求，避免对眼部造成刺激。膜剂的性状评价无准确标准，会因实验人员的不同而产生较大差异，评价结果有着很强的主观因素，会随着评分人员的不同而产生变化。由于制备者的不同，或者批次的不同对其含量，厚度等方面都会产生影响，因此其质量不可控因素较多。
参考文献：
[1] 张华珺，陈敏，李慧，等. 硫酸软骨素间苯三酚光度分析法的改进研究[J]. 食品研究与开发，2006， 27(7)： 163-168
[2] 连晓佳，多种换孢菌素A眼用制剂稳定性， 结膜刺激性IL-6水平影响的研究[D]. 天津： 天津医科大学， 2014： 6-7
[3] 李沙，李晓飞，刘娟，等.紫草膜剂的制备及左旋紫草素的含量测定[J]， 中国医院药学杂志， 2011， 31(12)：962-963, 百拇医药(崔颖 陈继成 陈红艳)