(精华制药集团南通有限公司，江苏南通 226407)

    5-氟胞嘧啶(5-Flμcylosine) (简称5-FC)，化学名为4-氨基-5-氟-2(1H)-嘧啶酮，对隐球菌属和念珠菌属等具有较高抗菌活性，对着色真菌、少数曲霉菌属有一定抗菌活性，其抗菌作用在临床上得到广泛应用，其药用机制是替代尿嘧啶进入DNA 分子中，阻断核酸合成，也是抗癌原料药卡培他滨、氟西他滨关键中间体[1]。

    5-氟胞嘧啶的杂质控制方法在中国药典中已有摘录，但应对国外市场，必须符合欧洲以及美国药典的要求。为此，本实验室为更好地控制产品质量，在中国药典的基础上，结合欧洲及美国药典的要求，对测试方法进行了专题研究和一定程度的优化。

    1 探讨与分析

    1.1 检测方法的选择

    美国药典采用薄层色谱法(TLC)检测5-氟胞嘧啶的有关物质，中国药典和欧洲药典都采用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography HPLC)检测5-氟胞嘧啶的有关物质。高效液相色谱法用作定量分析时，较薄层色谱法更为准确，且精确度和灵敏度高。因此，选择HPLC 测定5-氟胞嘧啶的有关物质。

    1.2 流动相的选择

    为选取最优的流动相体系，分别考察了中国药典方法流动相A(甲醇-水)、欧洲药典方法流动相B(甲醇-磷酸二氢钾水溶液)、流动相C(甲醇-磷酸二氢钠水溶液)3 种流动相体系，在同一浓度下进行峰面积比较。结果表明，当选取流动相C 时，其灵敏度和峰形达到最佳，相邻峰之间的分离度较好，因此最终选择流动相C 作为最优流动相体系。

    1.3 检测波长的确定

    为选取最合适的检测波长，用加有杂质的氟胞嘧啶溶液在200 ～ 380 nm 进行波长扫描。测试结果表明，在260 nm 处，氟胞嘧啶和其杂质均有较大吸收，故选择260 nm 作为检测波长。

    2 改进后的方法学验证

    2.1 验证参数

    专属性、重复性、中间精密度、准确度、检出限、定量限、线性范围、耐用性[2-5]。

    2.2 仪器与试剂

    岛津LC-20AT 高效液相色谱仪及Labsolution CS工作站、色谱柱C18(4.6×250 mm×5μm)、氟胞嘧啶标准品(R03100)、氟尿嘧啶标准品(R009T0)、氟胞嘧啶原料药(自制)等。甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯。

    2.3 色谱条件 ......