姜黄素对大鼠心室肌细胞快钠流和L型钙流的影响
外液,离子通道,1材料和方法,2结果,3讨论
施通,吴辉,高元兴,岳军,刘付丽,徐旭仲(温州医学院附属第一医院 麻醉科,浙江 温州 325000)
姜黄素(curcumin)是从姜科姜黄属植物姜黄(curcuma longa L)根茎中提取的一种酚类天然色素。在传统的印第安医学中它被用以治疗各种各样的疾病,包括风湿病、躯体疾病、皮肤病、消化功能紊乱、间歇性发热、白斑病和闭经等[1-2]。最近几年,大量研究数据阐明了姜黄素非在体条件下的潜在药理学作用,包括抗微生物、抗病毒、抗真菌、抗感染和抗肿瘤等作用。但其对心脏的作用研究报道较少,目前鲜见其对心肌细胞离子通道产生影响的研究。本研究采用全细胞膜片钳记录技术,观察姜黄素对急性分离的大鼠心室肌细胞钠通道和钙通道电流的影响,阐明姜黄素对心肌细胞离子通道的作用机制,为姜黄素的药理开发和安全使用提供实验依据。
1 材料和方法
1.1 实验动物和试剂 成年清洁级SD大鼠250~300 g,由温州医学院动物中心提供。I型胶原酶(collagenaseI),XIV型蛋白酶(protease XIV),牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA),姜黄素(curcumin),二甲基亚砜(DMSO),N-2-羟乙基哌嗪-N’-2-乙磺酸(HEPES)、乙二醇-双四乙酸(EGTA)、氯化铯(CsCl)、谷氨酸(L-Glutamic acid)、牛磺酸(taurine)、CaCl2、Na2ATP、MgATP、CsOH为Sigma公司产品。氯化四乙胺(TEA-Cl)为Lancaster公司产品。其余化学试剂为国产分析纯试剂。
1.2 溶液配制 分离心室肌细胞和记录离子通道电流所使用的溶液配制如下(单位为mmol/L):①台氏液:NaCl 137、KCl 5.4、CaCl21.8、MgCl21.0、NaH2PO40.33、HEPES 10、Glucose 10,用NaOH调pH至7.35。台氏液中去除CaCl2即为无钙台氏液。②KB液:KCl 40、KH2PO420、MgSO43.0、KOH 80、谷氨酸50、牛磺酸20、HEPES 10、Glucose 10、EGTA 0.5,用KOH调pH至7.35。③ICa-L细胞外液:Choline-Cl 140、MgCl21.0、CaCl22.0、HEPES 5、Glucose 10、CsCl 4.6、TEA-Cl 10 ......
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