王平，孟立平，刘龙斌，郭航远，3，4

    1.绍兴市人民医院 浙江大学绍兴医院 心内科，浙江 绍兴 312000；2.绍兴文理学院附属医院 绍兴市立医院 心内科，浙江 绍兴 312000；3.温州医科大学 研究生院，浙江 温州 325035；4.绍兴文理学院医学院，浙江 绍兴 312000

    糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy，DCM)是发生在糖尿病患者身上的一种独立于冠心病、心脏瓣膜病等心血管疾病的影响心脏结构和功能的病变[1]。糖代谢异常及微血管病变所引起的心肌细胞凋亡和心脏纤维化是DCM的主要病理特征，导致患者心功能损害，并最终进展为心力衰竭、心律失常及心源性休克。随着糖尿病的发病率在全球逐年增加，DCM的发病率也随之升高，已成为影响糖尿病患者生活质量以及预后的重要因素[2]。

    心脏成纤维细胞的激活和心肌细胞的变性是心脏重构的细胞生物学基础，也是DCM形成的病理生理基础[2]。心脏成纤维细胞由静止型活化为激活型，增殖和迁移能力增加，并开始大量分泌细胞外基质，分泌MMP-2和TIMP-1等影响细胞外基质动态平衡的蛋白酶，造成心脏间质的纤维化，最终导致心肌重构[3-4]。

    钠-葡萄糖协同转运蛋白(sodiumglucose cotransporter，SGLT)属于溶质载体5基因家族，以消耗能量的方式逆浓度梯度转运葡萄糖，在葡萄糖的主动转运过程中起着重要的作用[5]。我们过去的研究发现高糖可以促进心脏成纤维细胞中SGLT1和MMP-2的表达[6]，但是高糖是否是通过诱导心脏成纤维细胞激活从而促进心脏的纤维化，SGLT1是否参与高糖诱导的心脏成纤维细胞激活尚未见研究报道。本研究拟通过细胞实验探索高糖是否能促进心脏成纤维细胞的激活以及SGLT1在其中的作用。

    1 材料和方法

    1.1 材料 葡萄糖购自美国Sigma公司；胎牛血清、胰酶以及青霉素和链霉素购自美国Gibco公司；DMEM培养基(用于后续实验)、DMEM高糖培养基(用于原代细胞培养)、PBS购自杭州吉诺公司；MTT、EdU购自美国Emresco公司；Transwell小室购自美国康宁公司；DAPI购自美国Rcohe公司；Lipofectamine 3000转染试剂和TRIzol RNA试剂盒购自美国Invitrogen公司；反转录试剂盒购自北京Promega公司；si-SGLT1购自上海吉凯生物公司；SGLT1抗体购自美国Abcom公司；辣根过氧化酶及FITC标记的二抗购自美国Jackson公司；蛋白免疫印迹相关试剂购自苏州碧云天生物技术研究所 ......