郑余银，冯艺佳，阮青青，屠文展

    1.温州医科大学附属第二医院 康复医学科，浙江 温州 325027；2.温州医科大学附属第一医院 神经内科，浙江 温州 325015

    帕金森病(Parkinson"s disease，PD)是世界上第二大神经退行性疾病，其主要临床表征为静止性震颤、肌肉僵直、运动迟缓，部分患者伴有焦虑、抑郁、记忆减退等精神类障碍[1]。左旋多巴胺药物被广泛应用于PD患者治疗中，但该药物对静止性震颤无效，且会造成肠胃不适、恶心等不良反应，同时，长期服用左旋多巴胺的PD患者表现出对药物不敏感，且伴随易动症[2-4]。因此，寻找新的用于缓解或治疗PD的药物具有重要的临床和社会价值。咖啡因是咖啡的主要活性成分之一，大量的流行病学调查表明长期饮用咖啡可有效延缓PD的病理进程[5-7]。LUAN等[8]通过动物实验发现，长期饮用咖啡因可有效减轻小鼠纹状体由α-突触核蛋白(α-synuclein，α-Syn)聚集引起的细胞凋亡及炎症反应，但咖啡因在PD病理进程中的保护机制尚不明确。本研究通过在小鼠海马脑区注射α-Syn纤维体，模拟α-Syn在海马脑区累积而引起的认知功能障碍，利用转录组学分析探讨咖啡因缓解α-Syn造成认知功能受损的可能分子机制。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物：10周龄雄性C57BL/6小鼠，体质量22～25 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司上海分公司，实验动物许可证号：SCXK(沪)2017-0011。饲养环境为(23±2)℃，12 h/12 h光照/暗周期。所有实验动物操作规范均按照温州医科大学实验动物管理规定进行。

    1.1.2 试剂和仪器：α-Syn纤维体(No.SPR-317)购自加拿大StressMarq公司；咖啡因(Cat#C0750)和戊巴比妥钠购自美国Sigma公司；DAB试剂盒(abs957)购自上海Absin公司；α-Syn抗体(ab209538)购自英国Abcam公司；RNA提取试剂TRIzolTM(15596026)购自美国Thermo Fisher公司；cDNA反转录合成试剂盒(RR037A)购自日本Takara公司；SYBR Green试剂购自美国BIO-RAD公司；光学显微镜DFC7000 T购自德国Leica公司；脑立体定位仪(68507)购自深圳瑞沃德生命科技有限公司 ......