CD20阳性表达及与儿童急性B淋巴细胞白血病预后相关性研究
【摘 要】本文通过探讨急性B淋巴细胞白血病患儿CD20阳性表达情况及与预后关系，得出以下结论：推测CD20阳性表达可能是影响急性B淋巴细胞白血病患儿预后的危险因素，为下一步研究确证提供了线索。
【关键词】急性B系淋巴细胞白血病；儿童；CD20；预后
急性淋巴细胞白血病(ALL)是临床上较为常见的儿童血液系统恶性肿瘤，小儿ALL总体治愈率高达70%～85%[1]，但仍有一部分患儿对治疗方案不敏感，易出现复发。本研究针对CD20在急性B系淋巴细胞白血病患儿表达情况及其与患儿预后的关系进行探讨，以期为临床实践提供基础资料。
1资料与方法
1.1一般资料
选取2009年1月至2013年7月在郑州儿童医院初诊急性B系淋巴细胞白血病患儿136例，其中，男性86例，女性50例，年龄3个月～15岁，中位年龄5.8岁，中位随访时间28.6个月，所有患儿均符合儿童急性淋巴细胞白血病诊疗建议[1]，所有患儿均进行免疫分型、骨髓细胞形态、微小残留病变(MRD)筛选和细胞遗传学检测，对于有MRD标记的患儿在诱导缓解的第35d再次对MRD进行监测。
1.2方法
1.2.1免疫分型和细胞遗传学检测
利用直接免疫荧光流式细胞技术进行标准化检测，流式细胞仪购自美国Beckman Coulter公司。所使用的单抗包括T淋巴细胞系、髓系，以及干/祖系细胞标志、胞浆抗原，均购自美国BD公司。分析标准为每检测10000个有核细胞，胞浆抗原表达>10%记为阳性，白血病相关抗原表达>20%记为阳性。
1.2.2 MRD检测
利用Ficoll淋巴细胞分离液从患儿骨髓标本中分离单个核细胞，使每管细胞数10万个左右，若抗原表达出现：CD21、CD22和CD58呈强表达，CD38和CD45呈弱表达，CD34和cu出现同时表达，CD66c出现表达；则进一步对四色抗体组合进行检测。若四色抗体组合在双参数点图上位置与正常骨髓有明显区别且不重叠，则作为有效的筛选标记，进行后续MRD检测，对于没有出现变化的，则提示患儿缺乏筛选指标。
1.2.3骨髓细胞形态和细胞遗传学检测
骨髓细胞形态按照FAB标准进行分型，利用G显带方法对染色体进行分析，融合基因检测采用荧光原位杂交技术。
1.3统计学处理
利用SPSS15.0统计分析软件进行统计学处理，计量资料采用 表示，组间比较采用t检验，计数资料采用率值表示，组间比较采用χ2检验，生存分析采用K-M法，生存曲线比较采用Log-rank检验，P<0.05差异具有统计学意义。
2结果
2.1一般情况
136例初诊急性B系淋巴细胞白血病患儿，中位年龄5.8岁，中位随访时间28.6个月，其中，54例(39.7%)为CD20阳性，82例(60.3%)为CD20阴性。
2.2 CD20表达与患儿临床特征分析
CD20阳性表达与性别、年龄、WBC、HB、PLT、形态学分型、危险度分型、细胞遗传学均无统计学相关性，差异均无统计学意义(P>0.05)。
2.3 CD20表达与MRD相关性
CD20+组患儿在诱导化疗缓解第35dMRD≥0.01的比例为37.0%，高于CD20-组的17.0%，差异具有统计学意义(P<0.05)，两组患儿在MRD出现≥2次的比例差异无统计学意义(P>0.05)。
2.4 CD20表达与患儿生存率和生存时间的关系
总体生存时率(OS)是指从治疗到死亡的总体生存情况，无事件生存时间(EFS)是指从治疗到发生死亡、复发、未缓解或末次随访日期。CD20阳性组患儿OS为75.9%(41/54)，CD20阴性组患儿OS为82.9%(68/82)，两组相比差异无统计学意义(χ2=1.003，P=0.317)，CD20阳性组患儿EFS为(66.930±4.326)%，CD20阴性组患儿EFS为(73.343±4.477)%，差异无统计学意义(χ2=0.249，P=0.617)
3讨论
本研究显示，136例急性B系淋巴细胞白血病患儿CD20阳性率39.7%，高于袁缘等[2]报道的27%，结果显示，CD20阳性表达与性别、年龄、WBC、HB、PLT、形态学分型、危险度分型、细胞遗传学均无统计学相关性，说明CD20阳性表达并不受患儿临床特征的影响，与Mannelli等研究结论相同。对白血病患者MRD各节点进行监测已被认为改善预后的因素，有研究指出[13]，诱导缓解后MRD≥1是预后不良的危险因素。本研究显示，CD20+组患儿在诱导化疗缓解第35dMRD≥0.01的比例为37.0%，高于CD20-组的17.0%(P<0.05)，两组患儿在MRD出现≥2次的比例差异无统计学意义(P>0.05)，提示CD20+组患儿诱导缓解期MRD≥0.01比例较高，可能是影响患者预后的因素，生存分析显示，CD20阳性组患儿OS为75.9%，低于CD20阴性组患儿的82.9%，CD20阳性组患儿EFS为(66.930±4.326)%，低于CD20阴性组患儿EFS的(73.343±4.477)%，但差异均无统计学意义(P>0.05)，说明虽然两组患儿生存分析差异无统计学意义，但CD20阳性患儿总体生存情况较CD20阴性组患儿差，结合诱导缓解期MRD≥0.01比例情况，推测CD20阳性表达可能是影响急性B系淋巴细胞白血病患儿预后的危险因素。
综上所述，急性B系淋巴细胞白血病患儿CD20阳性表达与临床特征无关，CD20阳性患儿诱导缓解期MRD≥0.01比例较高，患儿总体生存情况不如CD20阴性患儿，推测CD20阳性表达可能是影响患儿预后的危险因素。
参考文献：
[1]中华医学会儿科学分会血液学组，中华儿科杂志编辑委员会.儿童急性淋巴细胞白血病诊疗建议(第三次修订草案)[J].中华儿科杂志，2006，44(5)：392-395.
[2]袁媛，欧丹艳，何云燕，等.CD20阳性儿童B系急性淋巴细胞白血病临床特点及生存分析[J].中国小儿血液与肿瘤杂志，2013，18(5)：222-225. (马平 田亮 刘炜 王小稳)
【关键词】急性B系淋巴细胞白血病；儿童；CD20；预后
急性淋巴细胞白血病(ALL)是临床上较为常见的儿童血液系统恶性肿瘤，小儿ALL总体治愈率高达70%～85%[1]，但仍有一部分患儿对治疗方案不敏感，易出现复发。本研究针对CD20在急性B系淋巴细胞白血病患儿表达情况及其与患儿预后的关系进行探讨，以期为临床实践提供基础资料。
1资料与方法
1.1一般资料
选取2009年1月至2013年7月在郑州儿童医院初诊急性B系淋巴细胞白血病患儿136例，其中，男性86例，女性50例，年龄3个月～15岁，中位年龄5.8岁，中位随访时间28.6个月，所有患儿均符合儿童急性淋巴细胞白血病诊疗建议[1]，所有患儿均进行免疫分型、骨髓细胞形态、微小残留病变(MRD)筛选和细胞遗传学检测，对于有MRD标记的患儿在诱导缓解的第35d再次对MRD进行监测。
1.2方法
1.2.1免疫分型和细胞遗传学检测
利用直接免疫荧光流式细胞技术进行标准化检测，流式细胞仪购自美国Beckman Coulter公司。所使用的单抗包括T淋巴细胞系、髓系，以及干/祖系细胞标志、胞浆抗原，均购自美国BD公司。分析标准为每检测10000个有核细胞，胞浆抗原表达>10%记为阳性，白血病相关抗原表达>20%记为阳性。
1.2.2 MRD检测
利用Ficoll淋巴细胞分离液从患儿骨髓标本中分离单个核细胞，使每管细胞数10万个左右，若抗原表达出现：CD21、CD22和CD58呈强表达，CD38和CD45呈弱表达，CD34和cu出现同时表达，CD66c出现表达；则进一步对四色抗体组合进行检测。若四色抗体组合在双参数点图上位置与正常骨髓有明显区别且不重叠，则作为有效的筛选标记，进行后续MRD检测，对于没有出现变化的，则提示患儿缺乏筛选指标。
1.2.3骨髓细胞形态和细胞遗传学检测
骨髓细胞形态按照FAB标准进行分型，利用G显带方法对染色体进行分析，融合基因检测采用荧光原位杂交技术。
1.3统计学处理
利用SPSS15.0统计分析软件进行统计学处理，计量资料采用 表示，组间比较采用t检验，计数资料采用率值表示，组间比较采用χ2检验，生存分析采用K-M法，生存曲线比较采用Log-rank检验，P<0.05差异具有统计学意义。
2结果
2.1一般情况
136例初诊急性B系淋巴细胞白血病患儿，中位年龄5.8岁，中位随访时间28.6个月，其中，54例(39.7%)为CD20阳性，82例(60.3%)为CD20阴性。
2.2 CD20表达与患儿临床特征分析
CD20阳性表达与性别、年龄、WBC、HB、PLT、形态学分型、危险度分型、细胞遗传学均无统计学相关性，差异均无统计学意义(P>0.05)。
2.3 CD20表达与MRD相关性
CD20+组患儿在诱导化疗缓解第35dMRD≥0.01的比例为37.0%，高于CD20-组的17.0%，差异具有统计学意义(P<0.05)，两组患儿在MRD出现≥2次的比例差异无统计学意义(P>0.05)。
2.4 CD20表达与患儿生存率和生存时间的关系
总体生存时率(OS)是指从治疗到死亡的总体生存情况，无事件生存时间(EFS)是指从治疗到发生死亡、复发、未缓解或末次随访日期。CD20阳性组患儿OS为75.9%(41/54)，CD20阴性组患儿OS为82.9%(68/82)，两组相比差异无统计学意义(χ2=1.003，P=0.317)，CD20阳性组患儿EFS为(66.930±4.326)%，CD20阴性组患儿EFS为(73.343±4.477)%，差异无统计学意义(χ2=0.249，P=0.617)
3讨论
本研究显示，136例急性B系淋巴细胞白血病患儿CD20阳性率39.7%，高于袁缘等[2]报道的27%，结果显示，CD20阳性表达与性别、年龄、WBC、HB、PLT、形态学分型、危险度分型、细胞遗传学均无统计学相关性，说明CD20阳性表达并不受患儿临床特征的影响，与Mannelli等研究结论相同。对白血病患者MRD各节点进行监测已被认为改善预后的因素，有研究指出[13]，诱导缓解后MRD≥1是预后不良的危险因素。本研究显示，CD20+组患儿在诱导化疗缓解第35dMRD≥0.01的比例为37.0%，高于CD20-组的17.0%(P<0.05)，两组患儿在MRD出现≥2次的比例差异无统计学意义(P>0.05)，提示CD20+组患儿诱导缓解期MRD≥0.01比例较高，可能是影响患者预后的因素，生存分析显示，CD20阳性组患儿OS为75.9%，低于CD20阴性组患儿的82.9%，CD20阳性组患儿EFS为(66.930±4.326)%，低于CD20阴性组患儿EFS的(73.343±4.477)%，但差异均无统计学意义(P>0.05)，说明虽然两组患儿生存分析差异无统计学意义，但CD20阳性患儿总体生存情况较CD20阴性组患儿差，结合诱导缓解期MRD≥0.01比例情况，推测CD20阳性表达可能是影响急性B系淋巴细胞白血病患儿预后的危险因素。
综上所述，急性B系淋巴细胞白血病患儿CD20阳性表达与临床特征无关，CD20阳性患儿诱导缓解期MRD≥0.01比例较高，患儿总体生存情况不如CD20阴性患儿，推测CD20阳性表达可能是影响患儿预后的危险因素。
参考文献：
[1]中华医学会儿科学分会血液学组，中华儿科杂志编辑委员会.儿童急性淋巴细胞白血病诊疗建议(第三次修订草案)[J].中华儿科杂志，2006，44(5)：392-395.
[2]袁媛，欧丹艳，何云燕，等.CD20阳性儿童B系急性淋巴细胞白血病临床特点及生存分析[J].中国小儿血液与肿瘤杂志，2013，18(5)：222-225. (马平 田亮 刘炜 王小稳)