张 波 刘亚民 吴佳庆 苏 帅

    西安交通大学第一附属医院周围血管科，陕西 西安 710000

    外周动脉疾病是一种心脏外围区域的血管疾病，又称周围血管疾病，主要表现为狭窄性疾病，影响周围组织和器官的血液供应[1]。外周动脉疾病会引起行走时疼痛或者不适，常累及下肢且可发生在下肢的各个部位，发病率与年龄呈正比，是老年人常见的动脉疾病，吸烟和糖尿病能够增加该病的危险性。开放手术、血管内介入或二者联合同时行血运重建是治疗严重外周动脉疾病常用方法[2]，尽管手术治疗和血管内介入技术取得了突飞猛进的发展，但目前仍有30%的患者存在严重的血管受累不适合手术治疗，且动脉粥样硬化斑块聚集在腓动脉或胫后动脉中，增加了血运重建的难度[3]，这类患者只能选择药物治疗，但药物治疗仅针对扩张血管、抗血栓治疗，效果有限，所以寻找新的策略对缺血下肢的治疗至关重要。新血管形成的过程比较复杂，在血管生成期间，血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9，MMP9)在血管形成过程中起重要作用[4]。微小核糖核酸(microRNA，miRNA)具有高度的保守性，参与调控多种重要的生理和生化反应途径[5]。miRNA-519是非编码的小分子RNA，位于人类染色体19q13.41，具有重要的生理功能，参与肿瘤的发生和发展[6]，但miRNA-519在血管新生中尚未出现过相关报道。人类抗原R(human antigen R，HuR)是一种RNA结合蛋白，可提高mRNA稳定性，促进靶基因表达[7]。研究表明，HuR被发现与微血管密度增加相关，并参与和调节血管生成的相关因子，包括细胞因子、基质金属蛋白酶和生长因子[8]。因此本研究探讨miRNA-519抑制HuR、VEGF和MMP9表达对缺血下肢血管新生的影响，为临床上在外周动脉疾病治疗方面提供新方向，现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物

    72只清洁级SD雄性大鼠[SCXK(沪) 2020-0011]，体重220～300 g，平均(213.74±35.68)g，月龄为6个月，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司。

    1.1.2 主要实验药品和仪器

    胎牛血清 、山羊血清、磷 酸 盐 缓 冲 液(phosphate buffer saline，PBS)、青霉素、链霉素、多聚甲醛购自上海沪宇生物科技有限公司；水合氯醛、总核糖核酸提取试剂(TRIzol)试剂购自武汉博士德生物工程有限公司；牛血清白蛋白(bovine serum albumin ......