曹 圣，热增才旦，李永平，吴 萍，童 丽，包天佑

    (青海大学医学院，西宁 810001)

    五子衍宗方出自明代张时彻撰写的《摄生众妙方》[1]，方由菟丝子、枸杞子、车前子、覆盆子、五味子五味药组成，具有补肾益精的功效。其在临床上常用来治疗精液异常、少弱精子的男性不育[2]，但鲜有五子衍宗方治疗糖尿病性勃起功能障碍的研究。为了探讨五子衍宗方治疗糖尿病性勃起功能障碍的疗效及机制，本实验采用DM(糖尿病)性ED(勃起功能障碍)大鼠模型，以五子衍宗方及其拆方为干预措施，对五子衍宗方是否会影响生精细胞凋亡及NO-cGMP通路而改善DM性ED大鼠的生殖及勃起功能进行了初步研究。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及分组

    2月龄雄性SD大鼠100只(均有正常的性功能，交配试验证实)，体重200±20 g，由西安交通大学实验动物部提供，动物许可证号：SCXK(陕)2012-003。按随机数字表法将实验动物分为正常对照组、模型组、涩精组(拆方I号)、补肾组(拆方II号)及全方组(五子衍宗方干预组)，每组10只。

    1.2 药物选择

    五子衍宗方干预组处方：菟丝子40 g，枸杞子40 g，覆盆子20 g，五味子5 g，车前子10 g；拆方I号处方：覆盆子20 g，五味子5 g；拆方II号处方：菟丝子40 g， 枸杞子40 g，车前子10 g。药材均购自青海省中医院，由青海大学医学院药学系鉴定为正品。全方及拆方按比例称重、混合，煎煮之前浸泡30 min，然后分别煎煮两次，每次2 h，合并煎液，滤过，滤液分别减压浓缩至0.108、0.023、0.085 g/mL，保存(4℃)备用。

    1.3 主要试剂与仪器选择

    链脲佐菌素(STZ)，Sigma公司生产；阿朴吗啡(APO)，Sigma公司生产；OneTouch SelectSimple血糖仪，上海强生医疗器械有限公司生产；TUNEL细胞凋亡检测试剂盒，上海碧云天生物技术有限公司生产；一氧化氮合酶(NOS)测定试剂盒、蛋白定量测试盒(双缩脲法)，南京建成生物工程研究所生产；大鼠(Rat)环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA检测试剂盒，北京博奥拓达科技有限公司生产；TGL-16台式高速冷冻离心机，湖南湘仪实验室仪器开发有限公司生产；RT-6500酶标仪，深圳雷杜生命科学股份有限公司生产；TU-1810紫外可见分光光度计 ......