(中国人民解放军联勤保障部队第970医院神经内科,山东 烟台 264010)

    阿尔茨海默病和帕金森病等神经退行性疾病严重威胁人类生命健康，给病人家庭及社会造成了巨大的经济压力。研究显示，氧化应激诱导的神经细胞损伤与神经退行性疾病的发生发展密切相关[1-2]，减轻氧化应激诱导的神经细胞损伤对于神经退行性疾病的治疗尤为重要。微小RNA(miRNA)是一类内源性短链非编码RNA，参与调控细胞凋亡、氧化应激和炎症反应等生理或病理过程，在人类多种疾病的发生发展中发挥重要的作用[3-5]。MiR-19b是miR-17-92基因簇家族成员，在改善氧化应激所致的心肌损伤、肺损伤等方面发挥积极作用[6-7]。过氧化氢(H2O2)是细胞氧化代谢的重要产物，可以穿透细胞膜与胞内还原型铁离子反应产生羟自由基，能够造成多种组织细胞损伤，常用于建立细胞损伤模型[8-9]。有文献报道，miR-19b在阿尔茨海默病病人血清中表达下调，而上调其表达可改善阿尔茨海默病大鼠的认知功能[10]。但目前，miR-19b是否在H2O2诱导的神经细胞损伤中发挥保护作用尚不清楚。因此，本研究主要观察了上调miR-19b表达对H2O2诱导的神经细胞SH-SY5Y损伤的影响，并探讨其可能的分子机制，旨在为改善H2O2所致神经损伤提供新靶点。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂

    人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株购于上海锐聪实验设备有限公司，乳酸脱氢酶(LDH)和细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)试剂盒购于南京建成科技有限公司，1640培养液、胎牛血清和2.5 g/L胰蛋白酶购于美国Gibco公司，辣根过氧化酶标记的羊抗鼠或兔IgG抗体、BCA蛋白浓度测定试剂盒和细胞凋亡检测试剂盒购于碧云天生物技术研究所，磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路相关蛋白PI3K、AKT、磷酸化AKT(p-AKT)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)抗体均购于美国Santa Cruz公司，四甲基噻唑蓝(MTT)试剂购于美国Sigma公司。转染试剂脂质体2000以及总RNA提取试剂(Trizol试剂)购于美国Invitrogen公司 ......