(上海市金山区亭林医院普外科,上海 201505)

    甲状腺结节是最常见的内分泌疾病之一，发病率高达6%～7%，以良性结节多见[1-2]。已有研究显示，甲状腺结节的发生是遗传、免疫紊乱、激素失调等多种原因共同触发而导致甲状腺结构及功能异常，其中甲状腺细胞的增殖与凋亡平衡破坏在疾病的发生过程中起重要作用[3-4]。西医治疗甲状腺结节常出现结节复发、骨质疏松、甲状腺功能下降等副作用[5-6]，而中医药具有毒小效优、多环节、多途径治疗特点，在防治甲状腺结节、改善症状、调节机体免疫等方面优势明显[7]。消瘿方以“益气养阴、祛痰散结”为治则，为中药治疗“瘿病”代表性方剂，临床常用该方加减治疗甲状腺疾病。本研究旨在探讨消瘿方对甲状腺FRTL细胞增殖与凋亡的影响，为中医药治疗甲状腺结节提供基础理论支撑。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1实验动物 SPF级4周龄SD大鼠15只，雌雄不拘，体质量200～220 g，由上海斯莱克动物有限公司提供。

    1.1.2药物 消瘿方组方：黄芪30 g，玄参15 g，党参15 g，白芍15 g，北沙参15 g，制香附15 g，浙贝母15 g，夏枯草10 g，当归10 g，柴胡10 g，海浮石10 g，白芥子6 g，原药材均购自上海群力中草药店。全方加8倍体积水煎煮2次，并浓缩至人临床等效剂量的0.5、1.0、2.0倍剂量。左甲状腺素钠片购自默克雪兰诺有限公司，规格每粒50 μg。

    1.1.3主要试剂与仪器 大鼠甲状腺FRTL细胞株(武汉普诺赛)；DMEM培养基(美国Gibco)；bax、bcl-2、caspase-3多克隆抗体(英国Abcam)；GAPDH单克隆抗体(美国CST)；HRP-IgG二抗(武汉博士德)；MTT粉末、Hoechst 33258染液(上海碧云天)；RIPA、Trizol(北京中杉金桥)；CO2培养箱、酶标仪(美国Thermo)；超微量核酸蛋白测定仪(英国BioDrop)；凝胶成像分析系统、实时荧光定量PCR仪(美国Bio-Rad)。

    1.2 实验方法

    1.2.1含药血清的制备SD大鼠随机分为空白组、低浓度消瘿方组、中浓度消瘿方组、高浓度消瘿方组和阳性药组 ......