王亚飞,张振军,宋长亮,张磊

    (1 邯郸市中心医院肿瘤科,河北 邯郸 056000; 2 冀中能源峰峰集团总医院邯郸分院骨科)

    肺癌病死率位居恶性肿瘤的首位，多数病人确诊时已是晚期失去手术机会，其预后极差，多归因于目前缺乏有效的早期诊断途径[1-4]。晚期非小细胞肺癌(NSCLC)病人多采用以化疗为主的治疗方案[5-6]。值得注意的是肿瘤治疗效果与病人个体化特征密切相关，即便同一种治疗方案应用于有着相似临床诊断、临床分期及药物种类和剂量的不同患癌个体，亦可能产生不同反应。化疗敏感性已成为衡量化疗效果的主要指标[4]，而耐药性在治疗过程中很常见。微小RNA(microRNA)是一类非编码RNA，可通过调节特定基因的表达，参与肿瘤发展进程[7]。近年来的研究表明，microRNA在肺癌的发展、诊疗、放化疗敏感性等方面均发挥着重要作用[8-9]。例如，miR-141已被证实可作为NSCLC潜在的诊断标志物[10-11]；miR-141-3p在对化疗有效的NSCLC病人中呈低表达[12]。但目前关于miR-141-3p是否参与晚期NSCLC治疗过程中化疗敏感性机制的研究未见报道。本研究以体外实验方式，采用细胞转染探究miR-141-3p在NSCLC细胞系的表达，并探讨其对晚期NSCLC化疗敏感性的影响及其作用机制，为逆转肺癌化疗耐药性提供临床依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1试剂和仪器 NSCLC细胞株A549(中国科学院肿瘤研究所)；顺铂(北京沃凯生物科技有限公司)；miR-141-3p模拟物(miR-141-3p mimic)、miR-141-3p抑制物(miR-141-3p inhibitor)、Yes相关蛋白1载体(YAP1vector)、YAP1沉默表达(siRNA-YAP1)质粒和PCR引物(上海吉玛公司)；Matrigel胶(上海玉博生物科技有限公司)；倒置显微镜(Leica公司，德国)；CCK8试剂(上海翊圣生物科技有限公司)；Trizol试剂(北京百奥森泰生物技术有限公司)；两步法实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)试剂盒(上海联迈生物工程有限公司)；Western blot抗体(Abcam，UK)；ECL发光液(上海七海复泰生物科技有限公司)；双荧光素酶报告基因检测试剂盒(翌圣生物科技(上海)有限公司)。

    1.1.2研究对象 2016年6月—2018年6月，选择邯郸市中心医院不能手术的50例晚期NSCLC病人作为研究对象，术前均未接受放化疗及免疫治疗 ......