ARB和ACEI对裸鼠人子宫内膜癌移植瘤生长影响
体积,小鼠,血管,1材料与方法,1实验材料,2实验方法,3统计学分析,2结果,1EC组织中AT1R和ACE1的mRNA和蛋白表达,2ARB和ACEI作用不同时间对HEC-1-B细胞移植瘤生长的影响,3ARB和A
王路祎,张月华,张鑫,刘情,石海燕(佛山市第一人民医院病理科,广东佛山 528000)
子宫内膜癌(EC)是妇科常见的恶性肿瘤之一,其发病率逐年增高[1]。EC 病人血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)阳性群体的无病生存期明显缩短[2]。乳癌组织中AT1R 的阳性率为48%,与腋淋巴结转移呈正相关,表明AT1R 可能和肿瘤转移有关[3]。另外,血管紧张素转换酶(ACE1)在EC 中上调,且与肿瘤细胞的恶性生物学行为密切相关[4]。ACE1抑制剂(ACEI)和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)均可抑制肿瘤细胞生长和血管内皮生长因子(VEGF)介导的血管生成,并促进凋亡和坏死[5-7]。然而,ACEI和ARB对EC移植瘤生长的影响仍不清楚。为此,我们建立了裸鼠EC 移植瘤模型,分别使用ARB(氯沙坦)和ACEI(卡托普利)进行灌胃干预,以确定二者是否可抑制EC移植肿瘤的生长。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 人EC样本收集 2017年1月—2019年3月,从我院接受手术的病人中获得18例EC组织和相邻的正常组织,置于-80 ℃液氮中保存。本研究经我院医学伦理委员会批准,参与者均知情同意。
1.1.2 细胞系与试剂药品 人EC 细胞株HEC-1-B,购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。卡托普利购于中美上海施贵宝制药有限公司。氯沙坦购于杭州默沙东制药有限公司。TRIzol试剂购于美国英杰公司;ACE1 抗体(ab75762)、AT1R 抗体(ab124505)、VEGF-A 抗体(ab46154)、CD34单克隆抗体(ab81289)均购于美国Abcam 公司。TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒购于凯基生物技术有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测ACE1和AT1R基因表达 使用TRIzol试剂从组织样品中提取总RNA,使用Reverse Transcription试剂盒(Takara,Dalian,China)进行逆转录反应和cDNA合成 ......
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