杨茜,郑宪鑫,朱亮,唐锡龙,李永红

    (青岛大学,山东 青岛 266100 1 附属医院心内科；2 基础医学院；3 附属医院急诊内科)

    心血管病是全球发病率和死亡率最高的疾病之一。动脉粥样硬化被认为是心血管疾病的主要病理学基础[1]。血管平滑肌细胞(VSMCs)的死亡参与了动脉粥样硬化的病理生理过程[2]。铁死亡是细胞死亡的一种形式，以细胞内铁依赖性和脂质活性氧(ROS)的积累为特征[3]。多种化学和生物因素都能诱导细胞铁死亡。erastin是一种能够选择性杀死表达小T癌蛋白和大鼠肉瘤蛋白的工程肿瘤细胞小分子化合物，也是一种高效的铁死亡诱导剂[4]。花生四烯酸15-脂氧合酶 (ALOX15)是一种酶,参与了早期的炎症反应[5]。研究表明，ALOX15诱导VSMCs在调节血管张力和血管壁重塑中发挥重要作用[6]。然而，ALOX15能否参与调控VSMC的铁死亡途径尚未明确。本研究旨在探讨ALOX15对VSMCs铁死亡的影响。

    1 材料与方法

    1.1 细胞与试剂

    人主动脉VSMCs购自美国ATCC公司;DMEM高糖培养基、磷酸缓冲盐溶液(PBS)缓冲液、胰酶、40 g/L多聚甲醛-通用型组织固定液购自大连美仑生物技术有限公司;胎牛血清(FBS)购自中国吉泰依科赛公司;ALOX15过表达质粒购自于上海吉玛制药技术有限公司;erastin购自于美国Abmole公司;Lipfectamine 3000购自赛默飞世尔科技公司；RIPA裂解液(高强度)、BCA蛋白浓度检测试剂盒、Hoechst 33342/PI双染试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司;PAGE凝胶试剂盒购于上海雅酶生物科技有限公司;ALOX15抗体购自santa cruz生物技术有限公司,β-actin抗体及羊抗兔二抗和羊抗鼠二抗购自affinity公司;ECL化学发光试剂盒购自南京诺唯赞生物科技有限公司 ......