李雅静，石 红

    (1.山西省人民医院，山西 太原 030012;2.大连医科大学附属第一医院，辽宁大连 116011)

    卵巢癌是妇科常见恶性肿瘤之一，目前多采取肿瘤细胞减灭术辅以铂类为基础化疗的综合治疗，但大多数患者会复发或产生耐药，化疗是卵巢癌治疗中不可缺少的重要辅助手段。研究表明，HSP70、mtP53可阻止多种化疗药物或放疗引起的肿瘤细胞凋亡，抑制化疗药物在肿瘤细胞中的核苷酸改变，导致肿瘤细胞耐药[1，2]。而E1B缺陷型腺病毒能在P53基因突变肿瘤细胞中有效地复制、溶瘤，同时它还可以显著增强化疗药物的抗瘤作用，化疗药物及腺病毒溶瘤作用产生的多种肿瘤特异性抗原降解成多肽，可与HSP70结合，形成热休克蛋白抗原肽复合体(HSP-antigen complex，HAC)，共同表达于细胞表面，可激活机体免疫效应，达到协同抗癌的作用[3，4]。本文采用免疫组化法检测卵巢癌组织中HSP70和mtP53表达率，同时用Western blot法测定卵巢癌患者血清中HSP70在手术前后、化疗前后表达水平，旨在探讨E1B缺陷型腺病毒联合化疗在卵巢癌中应用的可行性及应用时机，为解决复发、耐药性卵巢癌的治疗探索一种新的治疗方法。

    1 资料与方法

    1.1 研究对象

    2000年1月至2004年12月山西省人民医院收治卵巢上皮性癌59例，其初治癌36例，复发癌23例，平均发病年龄为53岁(32～69岁)。根据1985年FIGO分期，Ⅰ期4例，Ⅱ期9例，Ⅲ期40例，Ⅵ期6例。免疫组化法检测mtP53、HSP70阳性率。对其中31例卵巢癌患者(初治癌29例，复发癌2例)，同时测定手术前后、化疗前后末梢血中的HSP70水平。所选患者均为首次治疗，术后采用以铂类药物为主的联合化疗6～8个疗程。应用铂类药物化疗后、复发时间大于6个月的卵巢癌患者，为对铂类药物敏感型卵巢癌;用铂类药物化疗后、复发时间小于6个月的卵巢癌患者，为对铂类药物耐药型卵巢癌。

    1.2 免疫组化染色

    采用 EliVisionTM Plus法。步骤如下:a)常规10%甲醛溶液固定组织标本，石蜡包埋，切片厚度4 μm，每个标本均制备苏木精曙红(HE)染色对照片。b)石蜡切片脱蜡和水化;高压锅抗原修复1.5 min;内源性过氧化物酶阻断10 min;滴加鼠抗人mtP53单克隆抗体、鼠抗人HSP70抗体(一抗)60 min;加聚合物增强剂(试剂A)20 min;加酶标抗鼠聚合物(试剂B)30 min;加DAB显色 ......