徐 鑫，姚玉芳，张福波，苗 娜，王 男，杨潮萍

    (沧州市中心医院 1.中医一科；2.神经内七科；3.神经内四科，河北 沧州 061000)

    帕金森病是一种发病率较高的中枢神经系统退行性疾病，其发病机制与遗传、黑质多巴胺神经元退行性病变及氧化应激密切相关，神经细胞氧化应激损伤是引起帕金森病的重要因素之一，1-甲基-4-苯基自由基离子(1-methyl- 4-phenylpy ridinium，MPP+)可引起神经细胞氧化应激损伤及促使细胞凋亡，并可用于建立帕金森病细胞模型的诱导剂[1-2]。长链非编码RNA(LncRNA)是一类长度超过220 nt的RNA分子，其可通过充当miRNA竞争性内源RNA分子而降解靶基因或抑制靶基因表达，进而参与帕金森病的形成过程[3-4]。LncRNA MAGI2-AS3在阿尔茨海默病和β-淀粉样蛋白诱导的神经细胞中表达上调，下调其表达可抑制细胞炎症反应及减轻细胞损伤[5]。但MAGI2-AS3在帕金森病发生发展过程中的作用尚未见报道。生物信息学分析显示MAGI2-AS3与miR-1277-5p存在结合位点，研究表明miR-1277-5p在MPP+诱导的SK-N-SH细胞中表达下调，抑制LncRNA NEAT1表达可通过miR-1277-5p/ARHGAP26轴抑制细胞炎症反应、氧化应激及凋亡[6]。但MAGI2-AS3/miR-1277-5p轴在帕金森病形成过程中的作用机制尚未阐明。因此，本研究从2019年12月至2020年10月期间采用MPP+诱导SK-N-SH细胞建立帕金森病细胞模型，探讨MAGI2-AS3是否可靶向调控miR-1277-5p的表达而参与帕金森病细胞模型损伤过程。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂 人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH购自美国ATCC；MPP+购自美国Sigma；DMEM购自美国Gibco；Lipofectamine2000、Trizol购自美国Invitrogen；反转录试剂盒、SYBR Green试剂盒购自美国Thermo Fisher；si-NC、si-MAGI2-AS3、miR-NC、miR-1277-5p mimics、anti-miR-NC、anti-miR-1277-5p购自广州锐博生物；LDH、MDA、GSH检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所；CCK-8、凋亡检测试剂盒购自北京索莱宝；兔抗人Bcl-2、Bax与二抗购自美国Abcam ......