Waters高效液相色谱仪标准操作规程.doc
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参见附件(214kb)。
1. 目 的
描 述 Waters 高 效 液 相 色 谱 仪 标 准 操 作 规 程 。
2. 适 用 范 围
化 验 室
3. 责 任 者
化 验 员 应 严 格 遵 照 该 操 作 规 程 , QC 主 管 负 责 监 督 本 规 程 的 实 施 。
4. 定 义
HPLC High Performance Liquid Chromatography , 高 效 液 相 色 谱 仪 。
5. 安 全 注 意 事 项
5.1 有 机 溶 媒 有 害 健 康 ， 各 溶 剂 瓶 口 应 封 严 。
5.2 注 意 检 查 废 液 桶 中 废 液 应 避 光 ， 防 止 废 液 桶 满 外 溢 。
6. 规 程
6.1. Waters HPLC的 组 成 ： 贮 液 器 ? 输 液 泵 ? 自 动 进 样 器 ? 分 离 柱 (柱 温 箱 ) ? 紫 外 检 测 器 ? 控 制 及 数 据 处 理 系 统 (Millennium 32化 学 工 作 站 )。
6.2. HPLC系 统 的 打 开 及 关 闭 顺 序
6.2.1 打 开 顺 序
* 对 于 分 体 式 ： 请 按 泵 、 进 样 器 、 柱 温 箱 、 检 测 器 的 顺 序 打 开 开 关 ， 待 各 部 分 分 别 显 示 初 始 化 完 毕 后 ， 最 后 打 开 Millennium 32化 学 工 作 站 。
泵 与 色 谱 工 作 站 的 连 接：对 于 510 泵，因 为 此 泵 与 色 谱 工 作 站 是 单 向 联 系 ， 如 要 使 泵 在 Remote 状 态 下 由 工 作 站 控 制 ， 首 先 要 在 泵 的 键 盘 上 按 Menu 键 ， 待 显 示 屏 切 换 至 Mode 状 态 下 ， 其 状 态 是 Loca ，按 Edit/Enter 键 ，在 Local 的 L 前 有 闪 动 的 光 标 显 示，按? 键， Local 转 换 成 Rem， 再 按 Edit/Enter 键，此 命 令 已 输 入 进 去, 最 后 按 Stop/Run 键， 使 泵 处 于Run 状 态 这 时 泵 和 工 作 站 的 连 接 即 告 成 功。 泵 的 任 何 动 作 都 可 由 工 作 站 来 控 制。还 应 注 意 这 一 步 工 作 在 每 次 开 机 时 都 要 进 行。
对 于 Alliance 2690 系 统 ： 先 打 开 Alliance 2690 主 机 、 检 测 器 电 源 开 关，待 初 始 化 完 毕 后 ，再 进 入 Millennium 32 化 学 工 作 站。
对 于 流 动 相 的 要 求：对 于 液 体 试 剂 应 尽 量 采 用 色 谱 纯 试 剂； 对 于 所 用 到 的 固 体 试 剂 应 采 用 分 析 纯 试 剂； 对 于 水，应 采 用 经 纯 水 机 处 理 过 的 超 纯 水； 流 动 相 在 使 用 前 一 定 要 经 0.45?m 的 滤 膜( 滤 膜 分 为 水 相 膜 与 有 机 相 膜， 确 保使 用 正 确 的 滤 膜， 参 见 附 表 ) 过 滤、超 声 真 空 脱 气 方 可 使 用， 严 禁 含 盐 的 流 动 相 未 经 过 滤 直 接 使 用。
应 养 成 良 好 操 作 习 惯：
规 范 操 作 ， 树 立 保 护 HPLC 整 套 系 统 的 概 念 ，尤 其 对 于 输 液 泵、色 谱 柱、检 测 器，在 使 用 后 应 及 时 冲 洗，以 免 污 染 而 使 其 寿 命 缩 短 或 损 坏，尤 其 如 操 作 者 使 用 了 含 盐 的 流 动 相， 更 应 注 意 清 洗 的 步 骤： 首 先 用 脱 过 气 的 纯 水 在 流 速 为1ml/min 左 右 冲 洗 30～60 分 钟 ， 再 用 含 50% 以 上 甲 醇 或 乙 腈 的 水 溶 液 以 相 同 的 流 速 冲 洗 20～30 分 钟 左 右。
如 要 卸 下 柱 子， 在 经 过 上 述 冲 洗 过 程 之 后，再 经 纯 甲 醇 或 乙 腈 以1ml/min 的 流 速 冲 洗 20~ 30 分 钟，柱 子 卸 下 后 应 马 上 拧 紧 柱 堵。
流 速 的 变 化 应 采 用 阶 梯 式 递 增 或 递 减 的 方 式， 启 动 泵 时， 应 在 2 分 钟 之 内 由 小 流 速 慢 慢 增 大 到 所 需 的 流 速， 泵 关 闭 时 亦 然( 流 速 递 减)。 切 忌 流 速 的 骤 变。
6.2.2 关 闭 顺 序
首 先 退 出 Millennium 32化 学 工 作 站， 再 关 闭 系 统 的 其 他 部 分 。
6.3. Millennium 32化 学 工 作 站
Millennium 32色 谱 管 理 系 统 是 集 数 据 采 集 、 处 理 、 HPLC系 统 的 控 制 、 结 果 的 管 理 、 报 告 的 打 印 为 一 体 的 综 合 系 统 。 下 面 就着 重 介 绍 该 系 统 的 基 本 操 作 知 识 。
6.3.1 Millennium 32化 学 工 作 站 的 进 入
打 开 化 学 工 作 站 ， 系 统 自 动 进 入 Program Manager界 面 ， 双 击 Millennium 肖 像 ， 这 时 进 入Millennium界 面 ， 双 击 Session Manager 图 标 ， 系 统 将 自 动 初 始 化 ， 以 使 工 作 站 和 HPLC整 套 系 统 进 行 联 接 。 初 始 化 后 ， 按 系 统 要 求 键 入 你 的 User Name和 Password， 这 时 你 已 进 入 该 系 统 。
6.3.2 Project的 进 入 和 建 立
* Project的 进 入： 在 Session Manager窗 口 下 ， 击 Project肖 像(或 从 View中 选 择 Projects), 在 其 中 有 已 建 好 的 Project， 双 击 你 所 需 的 Project肖 像 ， 再 进 行 你 想 做 的 工 作 。
* Project的 建 立
从 File中 选 择 New， 即 显 示 New Project的 画 面 。
在 Project Name 中 输 入 你 的 Project 名 称 。
在 Initiallze Project 项 目 中 选 择 Copy 中 的 filter and fields 或 Methods。
在 From Project 中 选 择 要 拷 贝 的 现 存 Project ......
1. 目 的
描 述 Waters 高 效 液 相 色 谱 仪 标 准 操 作 规 程 。
2. 适 用 范 围
化 验 室
3. 责 任 者
化 验 员 应 严 格 遵 照 该 操 作 规 程 , QC 主 管 负 责 监 督 本 规 程 的 实 施 。
4. 定 义
HPLC High Performance Liquid Chromatography , 高 效 液 相 色 谱 仪 。
5. 安 全 注 意 事 项
5.1 有 机 溶 媒 有 害 健 康 ， 各 溶 剂 瓶 口 应 封 严 。
5.2 注 意 检 查 废 液 桶 中 废 液 应 避 光 ， 防 止 废 液 桶 满 外 溢 。
6. 规 程
6.1. Waters HPLC的 组 成 ： 贮 液 器 ? 输 液 泵 ? 自 动 进 样 器 ? 分 离 柱 (柱 温 箱 ) ? 紫 外 检 测 器 ? 控 制 及 数 据 处 理 系 统 (Millennium 32化 学 工 作 站 )。
6.2. HPLC系 统 的 打 开 及 关 闭 顺 序
6.2.1 打 开 顺 序
* 对 于 分 体 式 ： 请 按 泵 、 进 样 器 、 柱 温 箱 、 检 测 器 的 顺 序 打 开 开 关 ， 待 各 部 分 分 别 显 示 初 始 化 完 毕 后 ， 最 后 打 开 Millennium 32化 学 工 作 站 。
泵 与 色 谱 工 作 站 的 连 接：对 于 510 泵，因 为 此 泵 与 色 谱 工 作 站 是 单 向 联 系 ， 如 要 使 泵 在 Remote 状 态 下 由 工 作 站 控 制 ， 首 先 要 在 泵 的 键 盘 上 按 Menu 键 ， 待 显 示 屏 切 换 至 Mode 状 态 下 ， 其 状 态 是 Loca ，按 Edit/Enter 键 ，在 Local 的 L 前 有 闪 动 的 光 标 显 示，按? 键， Local 转 换 成 Rem， 再 按 Edit/Enter 键，此 命 令 已 输 入 进 去, 最 后 按 Stop/Run 键， 使 泵 处 于Run 状 态 这 时 泵 和 工 作 站 的 连 接 即 告 成 功。 泵 的 任 何 动 作 都 可 由 工 作 站 来 控 制。还 应 注 意 这 一 步 工 作 在 每 次 开 机 时 都 要 进 行。
对 于 Alliance 2690 系 统 ： 先 打 开 Alliance 2690 主 机 、 检 测 器 电 源 开 关，待 初 始 化 完 毕 后 ，再 进 入 Millennium 32 化 学 工 作 站。
对 于 流 动 相 的 要 求：对 于 液 体 试 剂 应 尽 量 采 用 色 谱 纯 试 剂； 对 于 所 用 到 的 固 体 试 剂 应 采 用 分 析 纯 试 剂； 对 于 水，应 采 用 经 纯 水 机 处 理 过 的 超 纯 水； 流 动 相 在 使 用 前 一 定 要 经 0.45?m 的 滤 膜( 滤 膜 分 为 水 相 膜 与 有 机 相 膜， 确 保使 用 正 确 的 滤 膜， 参 见 附 表 ) 过 滤、超 声 真 空 脱 气 方 可 使 用， 严 禁 含 盐 的 流 动 相 未 经 过 滤 直 接 使 用。
应 养 成 良 好 操 作 习 惯：
规 范 操 作 ， 树 立 保 护 HPLC 整 套 系 统 的 概 念 ，尤 其 对 于 输 液 泵、色 谱 柱、检 测 器，在 使 用 后 应 及 时 冲 洗，以 免 污 染 而 使 其 寿 命 缩 短 或 损 坏，尤 其 如 操 作 者 使 用 了 含 盐 的 流 动 相， 更 应 注 意 清 洗 的 步 骤： 首 先 用 脱 过 气 的 纯 水 在 流 速 为1ml/min 左 右 冲 洗 30～60 分 钟 ， 再 用 含 50% 以 上 甲 醇 或 乙 腈 的 水 溶 液 以 相 同 的 流 速 冲 洗 20～30 分 钟 左 右。
如 要 卸 下 柱 子， 在 经 过 上 述 冲 洗 过 程 之 后，再 经 纯 甲 醇 或 乙 腈 以1ml/min 的 流 速 冲 洗 20~ 30 分 钟，柱 子 卸 下 后 应 马 上 拧 紧 柱 堵。
流 速 的 变 化 应 采 用 阶 梯 式 递 增 或 递 减 的 方 式， 启 动 泵 时， 应 在 2 分 钟 之 内 由 小 流 速 慢 慢 增 大 到 所 需 的 流 速， 泵 关 闭 时 亦 然( 流 速 递 减)。 切 忌 流 速 的 骤 变。
6.2.2 关 闭 顺 序
首 先 退 出 Millennium 32化 学 工 作 站， 再 关 闭 系 统 的 其 他 部 分 。
6.3. Millennium 32化 学 工 作 站
Millennium 32色 谱 管 理 系 统 是 集 数 据 采 集 、 处 理 、 HPLC系 统 的 控 制 、 结 果 的 管 理 、 报 告 的 打 印 为 一 体 的 综 合 系 统 。 下 面 就着 重 介 绍 该 系 统 的 基 本 操 作 知 识 。
6.3.1 Millennium 32化 学 工 作 站 的 进 入
打 开 化 学 工 作 站 ， 系 统 自 动 进 入 Program Manager界 面 ， 双 击 Millennium 肖 像 ， 这 时 进 入Millennium界 面 ， 双 击 Session Manager 图 标 ， 系 统 将 自 动 初 始 化 ， 以 使 工 作 站 和 HPLC整 套 系 统 进 行 联 接 。 初 始 化 后 ， 按 系 统 要 求 键 入 你 的 User Name和 Password， 这 时 你 已 进 入 该 系 统 。
6.3.2 Project的 进 入 和 建 立
* Project的 进 入： 在 Session Manager窗 口 下 ， 击 Project肖 像(或 从 View中 选 择 Projects), 在 其 中 有 已 建 好 的 Project， 双 击 你 所 需 的 Project肖 像 ， 再 进 行 你 想 做 的 工 作 。
* Project的 建 立
从 File中 选 择 New， 即 显 示 New Project的 画 面 。
在 Project Name 中 输 入 你 的 Project 名 称 。
在 Initiallze Project 项 目 中 选 择 Copy 中 的 filter and fields 或 Methods。
在 From Project 中 选 择 要 拷 贝 的 现 存 Project ......
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