《 现代免疫 ： ) ) 2 O 0 6{ I 第 2 6毪筇 3期

    补肾宁心方对去势雌兔免疫功能的影响

    郝群 ，李大金 ，周跃华 ，袁敏敏 ，孟毅。

    ( 1 . 南京军 区南 京总 医院妇 产科 ，南 京 2 1 0 0 0 2 ；2 . 复旦大学附属妇产科研究所生殖免疫室 ，上海 2 0 0 01 1 )

    摘要 ：为探i 1 f 补肾宁心h 刘。 去势雌兔免 疫功能 的影响 。2 4只 3月龄 新 西兰雌 兔随机 分为 正常对 照组 、假 手术组 、去势组

    ( 卵巢切除) 、巾约组( 卵巢切除并灌以补肾宁心中药复方) ，除正常对照组外均于卵巢切除 2周后给予高脂饮食，中药组同

    时灌胃给药，其余各组均灌服等量的蒸馏水，莲续 3个月。采j = } j MT T法测定外周血淋巴细胞增殖反应；同时采用半定量

    逆转录多聚酶链反应( RT P CR) 技术检测动 物脾脏 I 1 . - 2、I I 一 1 0 mRNA 的表达 量。结 果显示 ：雌免去 势后 ，动物外周 血淋

    巴细胞增殖活性较止常对照组明显降低；补’ 肾宁心方灌药后动物的外周血淋巴细胞增殖活性明显增强，补’ 肾宁心方对动物

    脾脏的I I r 2 mR NA表达水平有明显的上调作用.而对动物脾脏的 I I ， 1 0 mRN A表达水平有明显的下调作用。

    关键词 ：补肾宁心 力 。 ；绝经期 ；免疫 ；Th l型偏移

    中图分类号 ：R7 3 0 文献标识码 ：A 文章编号 i 1 0 0 1 — 2 4 7 8 ( 2 0 0 6 ) 0 3 — 0 2 3 9 0 4

    妇女进入围绝经期后随着体内雌激素水平的锐

    减 。骨质疏松 、心血管疾病 、感染以及恶性肿瘤 的

    发生率明显增加 ，提示雌激素可能有助于维持女性

    正常的器官及免疫 功能。虽然激素替代疗法( h o r

    mo n e r e p l a c e me n t t h e r a p y ，HR T) 可改善更年期妇

    女的 自主症状 以及预防骨质疏松 。但 由于其可增加

    子宫内膜癌 、脑卒中的发病率 。加之近期 WH1 一

    项 HRT试验的中期 结果提示 HRT对心血管疾病

    的发生 并无 一 级 预 防作 用… .更 进 一 步 限制 了

    HR T的临床应用 。因此开发我国国粹 中药可能

    成为治疗 同绝经期病症的有效途径。我们的前期研

    究 显示补肾宁心方可减轻去势雌兔动脉粥样硬化的

    形成 . 此摹础 进 · 步观察了补肾宁心方对

    去势雌兔免疫功能的影响。

    1 材料 与方法

    1 . 1 动物及分组 3月龄雌性健康纯种新西兰兔

    2 .体重2 . ( 卜一 2 . 4 k g 。由中国科学院上海实验

    动物中心提供。适 J 、 饲 养 1周 后 。随机 分为 4

    绢 。即 常对照( 6 ) ；似于术组 ："假性手术 ，不切除卵巢( 6 ) ；左势组：行双侧 卵巢切除术( 6

    收稿日期：2 O O 5】 2 l 【 】 {修l I J l l I 期：2 0 0 6 0 卜】 3

    基金项 目： I 海f I 件} 技攻 天资助项 『 l ( 0 ( 1 ， l ( ) 1 [ ) 【 】 ( ÷ 1 )

    作者简介：郝群( 】 9 7 ： { _ 1 . .} I I ) j 南l 人. I f f 『 I K 9 , I J .博 I .

    从事' t - ~ f f 一 内分泌 饱瘦州 | I J 的研究.

    通讯作者 ：卞人企( T I ：O 2 】6 3 1 5 7 3 3 】 . ma i l ：【 l j l i s h I - n i d ( 1 ¨

    cn)

    只) ；中药组 ：行 双侧卵巢切 除术 并灌服 给药 ( 6

    只) 。

    1 . 2 药物及试剂 补肾宁心方药主要 由生地 、仙

    灵脾、菖蒲、黄柏等组成。按该配方制成的水煎浓

    缩剂。每毫升含生药 3 . 7 g ，为我院的传统经验方 。

    M1 、 T购 白华美生物工程公司；R P MI 1 6 4 0培养液

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    ( . Re v e r s e p r i me r： ( ( j 【 、人( ； ( 、T( 、 ( ；TAG 【 ’ T【 、TTC T； I 1 .2.For wa r d 1 ) r i me r ： I " l 、 A T人T ( ； 【 ’ 【 ’

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    wa r d pr i me r ： 【 、 T( ；【 I 、 A T【 T T( ( 、( ”r ( ( ； T【 、r r T. Re v e r s e pr i me r ：TT( T八( 人【 、 ( ；【 、 【 F T【 ’ 【 ’

    . r C T T ( .由上海博业生物技术有限公司合成 。

    1 . 3 造模及给药方法 除正常对照组、假手术组

    外其余各组进腹切除双侧卵巢；假手术组进腹后暴

    露子宫 、输卵管 、卵巢后即关腹 。不切除卵巢。除

    正常对照组外各组均 丁术后 2周饲 以高脂 饲料 ( _ l i f !

    固醇 0 . 5 、蛋黄粉 1 5 、猪油 5 、基础饲料

    7 9 . 5 ) .中药组同时灌胃给药，每 口灌胃 1 次 .5

    ml / k g 。连续 l 2周 。正常对照组、假 手术组 以及

    去势组均给予等量蒸馏水灌胃。连续 l 2周。

    1 . 4 动物 外周血 淋巴细胞增殖试 验 参照 文献

    [ 3 ] .实验结束前抽取兔耳缘静脉血 8 m1 .以淋巴

    维普资讯 http://www.cqvip.com 《 现代免疫学} 2 o o 6年第 2 6 卷第 3期

    细胞分离液分离外周血单个核细胞 ( P B MC) ，然后

    用 P B S重悬细胞 ，1 5 0 0 g离心 1 0 mi n ，洗涤细胞

    1次。再 以 l 0 0 0 g离心 5 r ai n ，洗涤细胞 2次 .弃

    上清，获得 P B MC，用 R P MI 1 6 4 0完全培养液悬

    浮细胞。调整细胞浓度为 1 ×1 0 / ml ，加入 9 6 孔圆

    底培养板.每只动物设 3个复孔，取其均值，每孔

    加液为 1 0 0 l 细胞悬 液 +1 0 0 l 含 1 0 胎牛血清

    ( F C S ) 的R P MI 1 6 4 0完全培养液及C o n A( 终浓度为5

    / , g / m1 ) ，在3 7 ℃，5 C ( ) 下培养 7 2 h 。此后，取出

    培养板 ......