X

    板栗愈伤组织的诱导

    苏冬梅1

    , 罗丽华2

    , 杨定海2

    (1. 中南林学院生命科学学院, 湖南 株洲 412006; 2. 海南大学生命科学与农学院, 海南 海口 570228)

    [摘 要] 通过组织培养技术, 研究了不同基本培养基、不同外植体、不同植物生长物质对板栗品种韶栗18 号愈伤组织诱导的影响。

    结果表明, 韶栗18 号的适宜培养基为W PM + 0. 5 mg? L 62 BA + 0. 2 mg? L NAA , 以其胚培养的诱导率较高, 成愈率为79. 0%。

    [关键词] 板栗; 组织培养; 愈伤组织; 外植体; 培养基

    [中图分类号] S664. 2; S604+ . 3 [文献标识码] A [文章编号] 1003- 8981 (2004) 03- 0017- 03

    Research on Ca llus Induct ion of Ch inese Chestnut

    SU Dong-Me i

    1

    , LUO L i -Hua

    2

    , YANGD ing-Ha i

    2

    (1. Cent ral South Fo rest ry U niversity, Zhuzhou 412006, Hunan, Ch ina;

    2. L ife science and A gr iculture Co llege of Hainan U niversity, Haikou 570228, Hainan, Ch ina)

    Abstract : The effect of different medium s, different p lant lets and different mater ials on L i 18 w as researched using

    issue culture technique . The result show ed that the op t imalmedium w asW PM + 1. 0mg? L 62 BA + 0. 2mg? L NAA ,and the induced rat io of embryo w as the h ighest, w h ich w as 79. 0%.

    Key words : Ch inese chestnut; t issue culture; callus; p lant let; medium

    有关木本植物的离体培养技术已有较多的报道[ 1～ 6 ]。栗树是应用离体培养技术繁殖较早的木本植物之一,但有关这方面的报道为数不多, 在目前广泛栽培的 4 个栗属物种(中国板栗、欧洲栗、日本栗和美洲栗)中, 欧洲

    栗和美洲栗的组培研究主要集中在愈伤组织的诱导、微体繁殖、体细胞胚状体发生方面[ 7, 8 ]。而对于中国栗, 我

    国许多科研工作者也曾进行过实验, 但由于褐变相当严重[ 9, 10 ]

    , 至今尚未见到成功的报道。为此, 我们以板栗品

    种韶栗 18 号为材料, 研究了不同基本培养基、不同外植体及不同激素配比对其愈伤组织诱导的影响, 以期为中

    国栗的组培获得成功打下基础。

    1 材料与方法

    1. 1 试验材料

    试验材料采自湖南省林科院板栗试验园的中国栗, 品种为韶栗18 号。于 5 月初和 8 月初两次采成年树当

    年生嫩枝的无病虫害的茎段、叶柄和嫩叶制备外植体, 叶柄切成长 0. 5 cm 的小段; 叶片切成 0. 5 cm 2

    小块; 嫩

    茎基部的一小段及其上部叶片和顶芽除去, 并切成长0. 5 cm 左右的小段, 每一小段均带有腋芽, 接种于愈伤组

    织诱导培养基上(注意茎段极性)。10 月初采成年树上的果实进行胚培养。

    1. 2 试验方法

    采用单因子试验法, 每组实验重复2 次, 观测茎段、叶柄、叶片诱导愈伤组织的效果, 及其基本培养基、激素

    配比对愈伤组织诱导的影响。

    1. 2. 1 材料的消毒

    种子的消毒 先用中性洗衣粉将板栗果实洗涤, 流水冲洗彻底, 滤纸吸干表面水分, 转移到无菌超净工作

    台上, 用 70%的酒精表面消毒 2 m in, 蒸馏水洗 3 次, 再用 0. 1%的升汞浸 12 m in, 用无菌水冲洗 8 次, 每次 2

    经济林研究 2004, 22 (3) : 17219

    N onw ood Forest R esea rch

    X [收稿日期] 200320621

    [作者简介] 苏冬梅(1943- ) , 女, 湖南益阳人, 教授, 大学, 主要从事植物生理生化的教学与研究。

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.m in, 用解剖刀切开果皮, 取出种子(此种子带有种皮) , 再将种子依次用 70%酒精消毒 30 s, 0. 1%升汞灭菌 5

    m in, 无菌水冲洗8 次, 每次2 m in, 然后切开子叶, 取出带少许子叶的胚接种于培养基中。

    嫩枝消毒 成年树当年萌发幼嫩枝条的消毒, 采回枝条后先在流水下反复冲洗 0. 5～ 1 h, 再用饱和中性

    洗衣粉液洗涤枝条, 流水冲洗彻底, 滤纸吸干表面水分, 转移到无菌超净工作台上, 用 70%～ 75%酒精表面消

    毒30 s, 0. 1%升汞(加几滴吐温280)浸10～ 12 m in, 无菌水冲洗8～ 10 次 ......