【摘要】 目的 構建小鼠过表达GJB1基因的重组腺相关病毒(rAAV)载体，建立一种小鼠肾脏过表达GJB1基因的动物模型。方法 采用PCR扩增制备小鼠GJB1基因片段，利用基因重组技术构建含GJB1基因的重组质粒，将携带小鼠GJB1基因的腺相关病毒(AAV)穿梭质粒与pAAV-RC、pHelper共转染AAV-293 细胞，通过选择培养基筛选出同源重组的阳性克隆获得rAAV。将30只成年C57BL/6J雄性小鼠随机分为5组各6只(W1组、W2组、W3组、W4组及空白对照组)，经尾静脉将rAAV注射到W1 ～ W4组小鼠体内，分别于注射后1周、2周、3周、4周取其心脏、肝脏、肾脏组织行PCR检测GJB1 mRNA的表达情况，并经石蜡包埋切片后采用免疫组织化学法检测Cx32的表达 ......