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编号:13166095
姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠海马IRS1和pIRS1表达的影响(2)
http://www.100md.com 2013年5月1日 《中国中药杂志》 2013年第9期
     2.3 免疫组织化学检测及分析 按说明书进行免疫组化染色。每只选取5张脑片,在20倍物镜下,记数海马CA1区内染色阳性神经元数目;并以Imagepro Plus图象分析系统采集图像和分析,记录每组图像阳性细胞数。

    2.4 Western blot检测 蛋白质提取、蛋白质电泳、转膜、封闭、抗原抗体反应,膜的蛋白面朝上,置于洁净保鲜膜上。用吸管将配制的发光检测液转移到蛋白膜上,使其均匀覆盖,室温孵育1~2 min。赶出其间的气泡,固定在X线片暗盒内。在暗室中取一张X线片置于包裹的膜上,合上暗盒,曝光30 s至1 min。立即显影定影,根据其曝光强度,缩短或延长下一张X线片的曝光时间。Western blot胶片经Hp Scanjet G4050扫描成TIF格式图片,用quantity one分析软件对各组条带进行分析,将各组的整合灰度比例与内参(βactin)比较,并以βactin的ID为100% ......
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