表2 DNA接头和AFLP引物序列

    Table 2 Connector and primer sequences used in AFLP analysis

    1.4.4 PCR预扩增 酶切连接产物稀释10倍后用于AFLP预扩增反应模板，预扩增反应体系25 μL：模板2 μL；Preampmix 1 μL；dNTPs 0.5 μL；10×PCR buffer 2.5 μL；Taq DNA polymerase 0.5 μL；H2O 18 μL。离心数秒，按照下列条件进行PCR：94 ℃ 4 min；94 ℃ 40 s；56 ℃ 30 s；72 ℃ 80 s；34个循环后，72 ℃延伸6 min。预扩增产物稀释20倍后用于选择性扩增的模板。

    1.4.5 PCR选择性扩增 预扩增产物稀释20倍后用于选择性扩增的模板。反应体系25 μL：预扩增稀释样品 2 μL；10×PCR buffer 2.5 μL；dNTPs 0.5 μL；Pst I引物 1 μL；Mse I引物 1 μL；Taq DNA polymerase 0.5 μL；H2O 17.5 μL ......