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编号:13135193
丹参酮ⅡA磺酸钠对AngⅡ诱导心房成纤维细胞胶原合成及TGF—β1活化的影响(2)
http://www.100md.com 2014年3月15日 《中国中药杂志》 2014年第6期
     2.5 ELISA法测定活性TGF-β1及总TGF-β1含量 按TGF-β1免疫检测试剂盒说明书分别检测细胞培养上清中活性TGF-β1及总TGF-β1含量。总TGF-β1检测样本需经1 mol·L-1盐酸化处理;活性TGF-β1检测采用非盐酸化处理的上清液。各组所得结果与对照组进行对比,进行统计分析。

    2.6 总蛋白的提取 取5×105个各组干预后的心房成纤维细胞,加入5倍体积的裂解液孵育20 min,其组成为:Tris-HCl 50 mmol·L-1 pH 8.0,NaCl 150 mmol·L-1,EDTA 0.5 mmol·L-1,DTT 1 mmol·L-1, NP-40 1%,脱氧胆酸钠0.5%,SDS 0.1%,钒酸钠100 μmol·L-1 ......
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