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编号:12639687
基于荧光测序分型技术的六味地黄丸原料分子鉴别研究(3)
http://www.100md.com 2014年10月1日 中国中药杂志 2014年第19期
     在本实验中,中成药在纯化之前都未能扩增出条带,而使用DNA试剂盒进行纯化后,将里面含有的杂质去除掉,降低其对PCR的抑制作用,可以扩增出条带,为后面的鉴别工作奠定了良好的基础。但对药材中炮制原料DNA提取仍存在一定的问题,限制了中成药分子鉴别的适用范围。

    3.2 鉴别引物的筛选

    筛选扩增效率高、多态性高的引物作为荧光标记引物是中成药原料药材基原鉴别成功的关键。目前一些基因片段被应用于植物物种鉴别,其中包括核内部转录间隔区(ITS), 叶绿体基因间隔区(如psbA-trnH, atpF-atpH, psbK-psbI) 还有叶绿体编码区(如matK, rbcL, rpoB, rpoC1) 等[11-13,18-20]。经过对这些候选序列进行综合评定后发现,rbcL,matK,ITS 和psbA-trnH 序列较易扩增 [11,21-22] ......
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