羟基芫花素对UGTs及UGT1A1活性抑制作用种属差异的体外研究(3)
2.4HGK对UGT1A1半数抑制浓度(IC50)的测定
取UGT1A1的特异性底物β-雌二醇，测定不同浓度HGK作为抑制剂对其代谢的抑制作用，计算IC50。在孵育体系中，固定探针底物浓度不变(MLM和RLM：35 μmol·L-1；HLM和rUGT1A1：30 μmol·L-1)，HGK的浓度为0～150 μmol·L-1，根据2.3项下的步骤反应。终止反应后，HPLC测定探针代谢产物的含量，GraphPad Prism 5处理数据，计算HGK对代谢酶的IC50[10]。
2.5HGK对UGT1A1的抑制类型的确定
对IC50小于100 μmol·L-1的反应体系 ......
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取UGT1A1的特异性底物β-雌二醇，测定不同浓度HGK作为抑制剂对其代谢的抑制作用，计算IC50。在孵育体系中，固定探针底物浓度不变(MLM和RLM：35 μmol·L-1；HLM和rUGT1A1：30 μmol·L-1)，HGK的浓度为0～150 μmol·L-1，根据2.3项下的步骤反应。终止反应后，HPLC测定探针代谢产物的含量，GraphPad Prism 5处理数据，计算HGK对代谢酶的IC50[10]。
2.5HGK对UGT1A1的抑制类型的确定
对IC50小于100 μmol·L-1的反应体系 ......
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