小檗碱对脂肪胰岛素抵抗细胞PPARγ及脂肪分泌因子表达的影响(4)
3.8 小檗碱剂量依赖性干预mRNA表达研究 10,20,50,100 μmol·L-1多个剂量小檗碱用来干预IR脂肪细胞。qPCR和ddPCR均检测到小檗碱剂量依赖降低PPARγ mRNA表达,但两者存在细节上小差异;qPCR结果显示20,50,100 μmol·L-1小檗碱下调PPARγ 均呈现非常显著差异(P<0.01),而ddPCR仅在50,100 μmol·L-1剂量呈现显著差异(P<0.05)(图4)。
不同剂量小檗碱干预下脂联素和PPARγ 两者mRNA的变化趋势具有一致性,小檗碱剂量依赖性下调脂联素mRNA表达非常显著(P<0.01);对于低丰度表达的抵抗素和瘦素基因,qPCR仅能可信检测10 μmol·L-1小檗碱组抵抗素表达;小檗碱ddPCR可信检测到各剂量组的抵抗素和瘦素mRNA水平,小檗碱剂量依赖性下调两者mRNA表达非常显著(P<0.01)(表6)。
4 讨论
在检测转录水平的定量方法中都需要应用内参基因对目标基因表达量进行校正 ......
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不同剂量小檗碱干预下脂联素和PPARγ 两者mRNA的变化趋势具有一致性,小檗碱剂量依赖性下调脂联素mRNA表达非常显著(P<0.01);对于低丰度表达的抵抗素和瘦素基因,qPCR仅能可信检测10 μmol·L-1小檗碱组抵抗素表达;小檗碱ddPCR可信检测到各剂量组的抵抗素和瘦素mRNA水平,小檗碱剂量依赖性下调两者mRNA表达非常显著(P<0.01)(表6)。
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在检测转录水平的定量方法中都需要应用内参基因对目标基因表达量进行校正 ......
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