小檗碱对脂肪胰岛素抵抗细胞PPARγ及脂肪分泌因子表达的影响(1)
[摘要] 脂肪分泌细胞因子与脂肪组织胰岛素抵抗(IR)密切相关，在糖尿病的发生发展研究中越来越受到重视。该实验主要研究小檗碱对脂肪胰岛素抵抗(IR)细胞PPARγ和脂肪分泌因子mRNA表达的影响，探讨小檗碱增强胰岛素敏感性的分子机制及微滴数字PCR(ddPCR)方法的应用优势。该实验采用ddPCR绝对定量分析简单直观确定合适的内参基因，ddPCR和荧光定量法(qPCR)方法比较研究不同剂量(10，20，50，100 μmol·L-1)小檗碱干预IR 3T3-L1脂肪细胞中PPARγ、脂联素、抵抗素和瘦素mRNA表达；加入GW9662研究PPARγ和脂联素mRNA表达的内在关联。ddPCR结果发现β-actin 在脂肪细胞中表达稳定，适合作为内参基因对定量PCR数据标准化。ddPCR和qPCR方法均显示与IR模型组相比，10，20，50，100 μmol·L-1小檗碱呈现剂量依赖降低脂联素mRNA表达(P<0.01) ......
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