苦豆子遗传转化体系建立及SaLDC启动子缺失分析(4)
4 讨论
遗传转化是细菌与植物相互作用的过程，对外植体进行预培养，严格控制农杆菌侵染时间、农杆菌与愈伤组织的共培养时间，选择合适的农杆菌浓度以及添加乙酰丁香酮等酚类物质均可有效提高遗传转化的效率[18-19]。宿主细胞的生理状态和发育过程对遗传转化的结果有明显影响，只有当其处在对农杆菌良好的感受态时，才能有效接受外源DNA，启动遗传转化。培养15 d的苦豆子愈伤生长旺盛，处于增生期，GUS瞬时表达率最高，这与Collado[20]等研究菜豆处于增生期愈伤更有利于遗传转化的结果一致。农杆菌侵染时间和菌液浓度也是影响植物遗传转化效率的重要因素，本研究发现农杆菌菌液浓度A600控制在0.6～0.9，侵染时间为15 min可获得高的瞬时表达率。农杆菌附着后并不能立刻转化植物细胞，只有在创伤部位生存16 h以上的菌株才有此功能[21]，但是共培养时间过长，植物细胞易受毒害而死亡，并且导致后续操作中脱菌困难，本研究对苦豆子愈伤和农杆菌共培养48 h既可以得到最高的转化效率，同时又不致使愈伤组织细胞过度受害。
农杆菌Ti质粒的Vir区基因对T-DNA转移起介导作用 ......
您现在查看是摘要页，全文长 4259 字符。
遗传转化是细菌与植物相互作用的过程，对外植体进行预培养，严格控制农杆菌侵染时间、农杆菌与愈伤组织的共培养时间，选择合适的农杆菌浓度以及添加乙酰丁香酮等酚类物质均可有效提高遗传转化的效率[18-19]。宿主细胞的生理状态和发育过程对遗传转化的结果有明显影响，只有当其处在对农杆菌良好的感受态时，才能有效接受外源DNA，启动遗传转化。培养15 d的苦豆子愈伤生长旺盛，处于增生期，GUS瞬时表达率最高，这与Collado[20]等研究菜豆处于增生期愈伤更有利于遗传转化的结果一致。农杆菌侵染时间和菌液浓度也是影响植物遗传转化效率的重要因素，本研究发现农杆菌菌液浓度A600控制在0.6～0.9，侵染时间为15 min可获得高的瞬时表达率。农杆菌附着后并不能立刻转化植物细胞，只有在创伤部位生存16 h以上的菌株才有此功能[21]，但是共培养时间过长，植物细胞易受毒害而死亡，并且导致后续操作中脱菌困难，本研究对苦豆子愈伤和农杆菌共培养48 h既可以得到最高的转化效率，同时又不致使愈伤组织细胞过度受害。
农杆菌Ti质粒的Vir区基因对T-DNA转移起介导作用 ......
您现在查看是摘要页，全文长 4259 字符。