实验室前期，已构建了1株过表达MVA途径7个基因的底盘菌株NK2SQ，其可显著增加酿酒酵母内萜类化合物的合成通量[11]。在本研究中，底盘菌株NK2SQ中参与乙醇合成乙酰辅酶A的乙醇脱氢酶(ADH2)、乙醛脱氢酶(ALD6)和乙酰辅酶A合酶(ACS1)等酶基因的表达调控，猕猴桃Actinidia chinensis来源的橙花叔醇合酶(NES)基因(GenBank： JN2422431)密码子优化，NES与FPS酶蛋白融合，以及高密度发酵等策略进一步用于提高细胞工厂合成橙花叔醇的能力。相关结果为微生物发酵法生产橙花叔醇等倍半萜化合物奠定了基础。

    1材料

    11工具酶与试剂PrimeSTAR HS DNA聚合酶购自于大连宝生物工程公司；酵母基因组DNA提取试剂盒购自北京康为世纪有限公司；质粒小量快速提取试剂盒购自美国Axygen公司；氨苄青霉素、DNA清潔试剂盒与DNA回收试剂盒购自生工生物工程(上海)股份有限公司；酵母选择培养基购自北京泛基诺科技有限公司；麦角固醇、鲨烯和橙花叔醇标准品购自美国SigmaAldrich公司；其他试剂均为分析纯 ......