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编号:13088188
高产橙花叔醇的酵母细胞工厂创建(3)
http://www.100md.com 2017年10月8日 《中国中药杂志》 2017年第15期
     24橙花叔醇、麦角固醇及鲨烯的检测正己烷配制橙花叔醇,麦角固醇和鲨烯对照品溶液,使用GCMS进行样品的定性和定量分析[12]。橙花叔醇GCMS测定条件:进样口温度250 ℃,进样体积1 μL,不分流,溶剂延时3 min;色谱柱:HP5ms (025 mm×30 m);色谱条件:45 ℃,1 min,10 ℃·min-1到300 ℃保温5 min;MS条件:Full Scan: 50~750 amu。麦角固醇和鲨烯GCMS测定条件:进样口温度300 ℃,进样体积1 μL,不分流,溶剂延时12 min;色谱柱:HP5 ms(025 mm×30 m);色谱条件:80 ℃,1 min;20 ℃·min-1到300 ℃保温18 min;MS条件:SIM69,109,135,363,411。

    3结果与分析

    31橙花叔醇酿酒酵母细胞工厂创建及产物鉴定橙花叔醇合成酶基因(NES)能以酿酒酵母中生成的FPP为底物合成目标产物橙花叔醇,见图1。实验室前期,已构建了1株过表达MVA途径7个基因的底盘菌株NK2SQ,其可显著增加酿酒酵母内萜类化合物的合成通量[11] ......
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