1.6 Masson染色方法

    分别于给药后第7、14、28日，各组取1/3大鼠用于实验检测。大鼠腹腔注射10%水合氯醛溶液麻醉后仰卧位固定于解剖板上，打开胸腔，结扎右肺主支气管，取完整右肺，于-80 ℃冰箱冻存；将平口针头由心尖进入右心室，止血钳固定后，剪开左心耳，快速灌注PBS 100～200 mL，再缓慢灌注4%甲醛溶液，至左心耳流出无色液体，取出完整左肺，于4%甲醛溶液中固定。常规石蜡包埋，切片，进行Masson染色。

    1.7 肺组织中羟脯氨酸含量测定

    取肺组织100 mg左右，采用碱水解法测定肺组织匀浆中HYP含量，测定方法按照试剂盒说明书步骤进行。

    1.8 Western blot检测基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1的表达

    取肺组织样品100 mg，液氮速冻后在玻璃研钵中充分研磨，加蛋白裂解液500 μL，4 ℃、12 000 r/min离心30 min，收集上清液，即总蛋白样本。按BCA蛋白定量试剂盒操作方法进行蛋白定量，跟据上样量进行分装，每次上样体积约为20 μL，置于-20 ℃保存。上样前加入buffer，100 ℃加热5～10 min ......