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编号:13002496
红芪多糖对糖尿病大鼠视网膜血小板反应蛋白—1和血小板源性生长因子—B表达的影响(3)
http://www.100md.com 2017年3月1日 《中国中医药信息》 2017年第3期
     2.2 分组和给药

    除正常组10只大鼠外,将造模成功的50只大鼠按随机数字表法分为模型组、多贝斯组和HPS低、中、高剂量组,每组10只。多贝斯组每日给予多贝斯90 mg/kg灌胃,HPS低、中、高剂量组每日给予HPS 50、100、200 mg/kg灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃。给药体积均为10 mg/mL,每日1次,连续8周。

    2.3 指标检测

    2.3.1 标本取材 灌胃8周后,腹腔注射10%水合氯醛(3 mL/kg)麻醉大鼠,断颈处死,摘取眼球。左眼球去除眼前节,剥离视网膜组织,液氮速冻,置于EP管中,-80 ℃冰箱储存备用,用于qRT-PCR检测;右眼置于4%多聚甲醛(4 ℃,24 h)固定,再固定48 h后切除眼前节,乙醇脱水,二甲苯透明,浸蜡、包埋,视网膜连续切片。

    2.3.2 组织病理学观察 切片脱蜡,乙醇浸泡,苏木精染色,体积分数1%盐酸乙醇分化,体积分数1%稀氨水反蓝,伊红染色,乙醇梯度脱水,透明,中性树胶封片,镜下观察视网膜组织病理学变化。

    2.3.3 免疫组织化学检测血小板反应蛋白-1和血小板源性生长因子-B蛋白表达 按照兔抗人TSP-1、鼠抗人PDGF-B多克隆抗体免疫组化试剂盒和DAB显色试剂盒操作说明对切片进行染色 ......
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