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编号:12594218
成人表皮干细胞和汗腺细胞的体外分离和培养(3)
http://www.100md.com 2015年7月15日 中国美容医学2015年第14期
     2.2 CCK-8法检测细胞增殖

    实验组增殖曲线(图2)近似S形。细胞接种后1~2d处于潜伏期,第3天开始进入对数增殖生长,第7天达到高峰,而第6天生长不明显,细胞在96孔板中长满板的速度明显快于六孔板,第7天达到高峰。

    从统计学角度来讲,F统计量的sig0.000小于0.05,所以拒绝了方差相等的假设。t检验中,双侧sig值0.000小于0.05,因此,在0.05置信度水平时,可认为两者存在显著性差异。因此,实验组的细胞增殖显著高于对照组(表1、表2)。

    2.3 表皮干细胞免疫荧光表型结果

    第三代的人表皮干细胞荧光免疫细胞化学检测结果:β1整合素、p63和CK19强烈表达(图3A~C)。符合表皮干细胞表面标记物,证明所分离培养细胞为表皮干细胞。

    2.4 分离培养汗腺细胞形态

    Ⅱ型胶原酶消化剪碎的皮肤组织,可见汗腺组织游离,呈盘曲状(图4A),消化过度的汗腺组织则呈颗粒状(图4F)。细胞接种于六孔板,2~3d可见贴壁的汗腺组织,并且向外生长汗腺细胞(图4B),培养汗腺细胞的期间有成纤维细胞妨碍汗腺细胞的生长(图4C)。汗腺细胞从游离的完整汗腺组织中生长,呈多边形,持续分裂2周,部分细胞可在后期依然保持分裂能力 ......
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