1 材料与方法

    1.1 实验动物及主要试剂

    实验动物为2月龄雄性C57BL6/J小鼠12只，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，饲养条件为温度(21±2)℃、湿度(50±10)%、12 h/12 h昼夜等长循环光照，小鼠可自由饮水、进食。小鼠适应实验室环境至少1周后进行实验。c-Fos一抗为c-Fos(9F6)Rabbit mAb#2250，购自美国Cell Signaling Technology公司;c-Fos二抗为Alexa-568 goat anti-rabbit，购自美国Invitrogen公司。

    1.2 动物分组及处理

    实验前将小鼠随机分为对照组(A组)、禁锢后90 min组(B组)和禁锢后7 d组(C组)，每组4只。对3组小鼠进行高架十字迷宫行为学测试，检测其基础焦虑水平。B组和C组小鼠进行连续4 d的反复禁锢应激，分别于4 d禁锢后90 min和禁锢后7 d再次进行高架十字迷宫测试，然后立即进行灌注取脑。A组小鼠不做任何处理，直接从饲养笼中取出进行灌注取脑。整个实验过程中3组小鼠均正常饲养，没有出现小鼠缺失的情况。

    1.3 反复禁锢应激

    将小鼠用异氟烷轻度麻醉后放置于禁锢器中1 h，禁锢时间为每天下午14：00—15：00 ......