参附注射液对家兔心肺复苏后心肌细胞凋亡基因caspase—3的影响(1)
[摘要] 目的 探讨参附注射液(SF)对家兔缺氧型心跳骤停-心肺复苏(CA-CPR)模型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的影响。 方法 普通家兔18只，采用随机数字表法随机分为SF组、对照组和生理盐水(NS)组，每组6只。除对照组外，制作缺氧型CA-CPR模型。SF组给予参附注射液2.1 mL/kg(生理盐水稀释至5 mL)，对照组、NS组予生理盐水5 mL，分别在复苏后分3次每隔10 min缓慢注射。三组用药后采用RT-PCR法检测caspase-3 mRNA表达。 结果 与对照组比较，SF组和NS组caspase-3 mRNA表达增加(P<0.01)；与NS组比较，SF组caspase-3 mRNA表达减少(P<0.01)。 结论 SF对CPR后心肌细胞凋亡基因caspase-3活性有抑制作用。
[关键词] 参附注射液；心跳骤停；心肺复苏；心肌细胞凋亡；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3
[中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2016)36-0018-03
[Abstract] Objective To investigate the effect of Shenfu injection(SF) on caspase-3 in hypoxic cardioplegia-cardiopulmonary resuscitation (CA-CPR) in rabbits. Methods A total of 18 normal rabbits were randomly divided into SF group， control group and NS group by random number table method， 6 rabbits in each group. The hypoxic CA-CPR model was made except the control group. SF group was given 2.1 mL/kg of Shenfu injection(diluted by 5 mL of saline)， control group， NS group were treated by 5 mL saline， respectively， after recovery in three times every 10 min slow injection. The expression of caspase-3 mRNA in the three groups was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR). Results The expression of caspase-3 mRNA in SF group and NS group was increased compared with the control group(P<0.01). The expression of caspase-3 mRNA in SF group was decreased compared with NS group(P<0.01). Conclusion SF has inhibitory effect on the activity of cardiomyocyte apoptosis gene caspase-3 after CPR.
[Key words] Shenfu injection； Cardiac arrest； Cardiopulmonary resuscitation； Cardiomyocyte apoptosis； Caspase-3
心跳驟停(cardiac arrest，CA)是常见急危重症，心肺复苏(cardiopulmonary resuscitation，CPR)过程中心肌缺血再灌注(I/R)后会引起心功能损伤，其中心肌细胞凋亡起着重要作用。心肌缺血再灌注时对心肌细胞的损伤较为严重，不仅能够导致大量心肌细胞凋亡，同时也会由于缺血缺氧状态导致心肌损伤，造成心功能损伤，甚至很可能会再次发生心肌梗死或者心跳骤停，对心肺复苏患者的心脏功能和生命质量均造成严重的影响。现代研究表明，参附注射液(SF)对心肌缺血再灌注有重要的保护作用[1-4]。但是关于SF对心跳骤停心肺复苏患者心功能保护的作用机制研究尚未完全明确，尤其是保护作用机制仍待进一步研究证实。鉴于此，本研究通过研究SF对CPR后家兔心肌细胞凋亡基因caspase-3的影响，为SF在心肺复苏中的临床应用提供新的实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
动物：普通级家兔18只，体重约2～3 kg，雌雄不拘，由福建中医药大学动物中心提供[动物合格证号：(闽检证字)第2013A001号]。器材：美国惠普公司心电监护仪；有创动脉血压压力转换器；手提呼吸机。药品：参附注射液[雅安三九药业有限公司，批号：050809，每毫升含0.5 mg人参皂甙(C54H92O23)，0.1 mg乌头碱(C34H47NO11)]。试剂：caspase-3抗体(兔多克隆抗体，武汉博士德)。
1.2 模型制作、标本采集与检测
将家兔随机分为SF组、对照组、NS组，每组6只。除对照组外，制作缺氧型CA-CPR模型[5]，经耳缘静脉注射戊巴比妥钠(3%)麻醉，行颈总动脉置管术以监测平均动脉压，再行气管切开置管术以夹闭气管窒息复制缺氧CA-CPR模型；实验全程心电监护。SF组于复苏成功后，分3次注射，每隔10 min以2.1 mL/kg浓度的参附注射液用NS稀释至5 mL经颈外静脉缓慢注射；对照组、NS组用NS 5 mL颈外静脉注射；以心跳恢复4 h计算存活率，实验结束后，取新鲜的心肌组织50 mg机械破碎，待用。 (苏天生 罗继红 卢静)
[关键词] 参附注射液；心跳骤停；心肺复苏；心肌细胞凋亡；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3
[中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2016)36-0018-03
[Abstract] Objective To investigate the effect of Shenfu injection(SF) on caspase-3 in hypoxic cardioplegia-cardiopulmonary resuscitation (CA-CPR) in rabbits. Methods A total of 18 normal rabbits were randomly divided into SF group， control group and NS group by random number table method， 6 rabbits in each group. The hypoxic CA-CPR model was made except the control group. SF group was given 2.1 mL/kg of Shenfu injection(diluted by 5 mL of saline)， control group， NS group were treated by 5 mL saline， respectively， after recovery in three times every 10 min slow injection. The expression of caspase-3 mRNA in the three groups was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR). Results The expression of caspase-3 mRNA in SF group and NS group was increased compared with the control group(P<0.01). The expression of caspase-3 mRNA in SF group was decreased compared with NS group(P<0.01). Conclusion SF has inhibitory effect on the activity of cardiomyocyte apoptosis gene caspase-3 after CPR.
[Key words] Shenfu injection； Cardiac arrest； Cardiopulmonary resuscitation； Cardiomyocyte apoptosis； Caspase-3
心跳驟停(cardiac arrest，CA)是常见急危重症，心肺复苏(cardiopulmonary resuscitation，CPR)过程中心肌缺血再灌注(I/R)后会引起心功能损伤，其中心肌细胞凋亡起着重要作用。心肌缺血再灌注时对心肌细胞的损伤较为严重，不仅能够导致大量心肌细胞凋亡，同时也会由于缺血缺氧状态导致心肌损伤，造成心功能损伤，甚至很可能会再次发生心肌梗死或者心跳骤停，对心肺复苏患者的心脏功能和生命质量均造成严重的影响。现代研究表明，参附注射液(SF)对心肌缺血再灌注有重要的保护作用[1-4]。但是关于SF对心跳骤停心肺复苏患者心功能保护的作用机制研究尚未完全明确，尤其是保护作用机制仍待进一步研究证实。鉴于此，本研究通过研究SF对CPR后家兔心肌细胞凋亡基因caspase-3的影响，为SF在心肺复苏中的临床应用提供新的实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
动物：普通级家兔18只，体重约2～3 kg，雌雄不拘，由福建中医药大学动物中心提供[动物合格证号：(闽检证字)第2013A001号]。器材：美国惠普公司心电监护仪；有创动脉血压压力转换器；手提呼吸机。药品：参附注射液[雅安三九药业有限公司，批号：050809，每毫升含0.5 mg人参皂甙(C54H92O23)，0.1 mg乌头碱(C34H47NO11)]。试剂：caspase-3抗体(兔多克隆抗体，武汉博士德)。
1.2 模型制作、标本采集与检测
将家兔随机分为SF组、对照组、NS组，每组6只。除对照组外，制作缺氧型CA-CPR模型[5]，经耳缘静脉注射戊巴比妥钠(3%)麻醉，行颈总动脉置管术以监测平均动脉压，再行气管切开置管术以夹闭气管窒息复制缺氧CA-CPR模型；实验全程心电监护。SF组于复苏成功后，分3次注射，每隔10 min以2.1 mL/kg浓度的参附注射液用NS稀释至5 mL经颈外静脉缓慢注射；对照组、NS组用NS 5 mL颈外静脉注射；以心跳恢复4 h计算存活率，实验结束后，取新鲜的心肌组织50 mg机械破碎，待用。 (苏天生 罗继红 卢静)