1.2.3 重组载体的转化及鉴定 将连接产物转化DH5α感受态大肠杆菌，涂布于含60 μg/mL Amp的LB筛选平板上，37℃培养12～16 h。挑取部分转化单菌落，以pcDNA3.1+载体通用引物进行菌落PCR：94℃预变性2 min；94℃ 变性30 s，55℃ 退火30 s，72℃延伸45 s，共34个循环；72℃ 延伸1 min，4℃保存。以未转化的DH5α菌落作阴性对照，以pcDNA3.1+质粒作阳性对照。将经菌落PCR鉴定正确的菌落进行扩大培养，测序鉴定。

    1.2.4 重组质粒电转染BGC823细胞 BGC823細胞于37℃、5% CO2、饱和湿度培养。取处于对数生长中晚期细胞，用无血清1640培养基调整细胞密度至5×106 个/mL，取400 μL加入0.4 cm电转杯，加入经线性化的重组载体30 μg，冰浴10 min，于185 V、30 ms电击，电击后冰浴10 min，将细胞移至培养瓶中培养。

    1.2.5 转染细胞的筛选和检测 转染细胞培养48 h后，以含500 μg/mL G418的培养基筛选培养8 d ......