1 材料与方法

    1.1 试剂

    胎牛血清、DMEM培养基(高糖)、Opti-MEM培养基、Lipofectamine 2000、Superscrpt Ⅱ逆转录试剂盒、双链cDNA合成试剂盒均购自美国Invitrogen公司，RNeasy mini试剂盒购自德国Qiagen公司，Trizol试剂、SYBR Green荧光定量PCR试剂盒购自Takara公司，双荧光素酶报告基因检测试剂盒、psi-CHECK-2质粒DNA购自美国Promega公司。miR-519d模拟物mimic、抑制物inhibitor以及NC均由上海吉玛公司设计合成。荧光定量PCR引物由华大基因合成。四甲基偶氮唑盐(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)、碘化丙啶(PI)等购自Sigma公司。细胞周期检测试剂盒购自南京凯基生物技术有限公司。p21、GAPDH蛋白抗体购自Abcam公司。辣根过氧化物酶(HRP)标记二抗购自北京中杉金桥公司。

    1.2 仪器

    CO2培养箱购自上海Thermo Fisher公司 ......