[摘要] 目的 探讨miR-519d对人宫颈癌细胞中CDKN1A/p21基因的靶向调控作用以及对细胞增殖、周期的影响。方法 通过荧光定量PCR技术检测miR-519d抑制物对其活性的调控作用。在宫颈癌HeLa和SiHa细胞中下调miR-519d表达，利用MTT法检测细胞增殖能力，通过流式细胞术检测细胞周期的分布情况。将miR-519d mimic转染HeLa和SiHa细胞，用荧光定量PCR、Western Blot分别检测p21 mRNA和蛋白水平的表达。利用双荧光素酶报告基因系统确认miR-519d与p21的靶向关系。 结果 miR-519d抑制物能有效下调宫颈癌HeLa和SiHa细胞内miR-519d的表达。MTT实验和细胞周期分析结果提示，下调细胞内miR-519d的表达能够显著降低细胞增殖活力，并使细胞周期阻滞于G1期。进一步通过双荧光素酶报告基因系统鉴定miR-519d能够结合p21 mRNA 3′UTR有效抑制其表达 ......