水杨酰苯胺类mglu5拮抗剂作用模式及体外抗肿瘤活性研究(3)
3.7 化合物Ⅳ和化合物Ⅰ在mglu5活性口袋结合模式比较
如图8所示，将化合物Ⅰ与化合物Ⅳ对接到mglu5活性口袋中。由于化合物Ⅳ结构中苯胺上4’位为较长的氰基，而活性口袋长度有限，使得化合物IV在口袋中的结合构象同样产生了较大的倾斜，不仅降低了其在疏水腔中产生的疏水作用，而且使得其不能靠近关键的氨基酸残基SER809产生氢键。因此，在活性上化合物Ⅳ对mglu5的拮抗活性远低于化合物Ⅰ。
3.8 化合物Ⅰ-Ⅳ对肝癌HepG2细胞增殖的影响
目标化合物Ⅰ-Ⅳ对肝癌细胞HepG2具不同程度的抗增殖活性，IC50值分别为2.55 μmol/L、3.99 μmol/L、3.12 μmol/L和7.55 μmol/L。目标化合物体外抗HepG2增殖实验结果与mglu5拮抗活性具有一定的正相关性，即化合物Ⅰ活性在4个目标化合物中抗增殖活性最强，化合物Ⅳ抗增殖活性最差。见表2。
4 结论
本课题组前期设计合成的水杨酰苯胺化合物Ⅰ-Ⅳ，通过与mglu5的活性口袋产生疏水作用以及与活性口袋关键氨基酸残基SER809产生氢键作用，从而拮抗mglu5，并对HepG2细胞增殖产生抑制，符合文献[2]报道的mglu5的表达与HepG2细胞增殖正相关这一规律。对接研究发现：水杨酰苯胺取代基的种类、个数以及取代位置对mglu5拮抗活性有较大影响，此结合模式提供的信息将为针对mglu5这一靶点设计抗肿瘤新化合物提供新方向。
参考文献：
[1] WIJETUNGE L S， TILL S M， GILLINGWATER T H， et al. mGluR5 regulates glutamate-dependent development of the mouse somatosensory cortex[J]. J Neurosci， 2008， 28(49)：13028-13037.
[2] WU Y L， WANG N N， GU L， et al. The suppressive effect of metabotropic glutamate receptor 5 (mGlu5) inhibition on hepatocarcinogenesis[J]. Biochimie， 2012， 94(11)：2366-2375.
[3] VARNEY M A， COSFORD N D， JACHEC C， et al. SIB-1757 and SIB-1893： selective， noncompetitive antagonists of metabotropic glutamate receptor type 5[J]. J Pharmacol Exp Ther， 1999， 290(1)：170-181.
[4] COSFORD N D， TEHRANI L， ROPPE J， et al. 3-[(2-Methyl-1，3-thiazol-4-yl)ethynyl]-pyridine： a potent and highly selective metabotropic glutamate subtype 5 receptor antagonist with anxiolytic activity[J]. J Med Chem， 2003，46(2)：204-206.
[5] FELTS A S， SALEH S A， LE U， et al. Discovery and SAR of 6-substituted-4-anilinoquinazolines as non-competitive antagonists of mGlu5[J]. Bioorg Med Chem Lett， 2009， 19(23)： 6623-6626.
[6] 傅榕賡，杨辰枝子，严建业，等.水杨酰苯胺类mglu5拮抗剂的设计、合成及活性研究[J].湖南中医药大学学报，2017，37(5)：489-492.
(本文编辑 苏 维), http://www.100md.com(张弦 周鑫 尹华 张昊霖 文菲 熊广华 曹德良 廖端芳 傅榕赓)
如图8所示，将化合物Ⅰ与化合物Ⅳ对接到mglu5活性口袋中。由于化合物Ⅳ结构中苯胺上4’位为较长的氰基，而活性口袋长度有限，使得化合物IV在口袋中的结合构象同样产生了较大的倾斜，不仅降低了其在疏水腔中产生的疏水作用，而且使得其不能靠近关键的氨基酸残基SER809产生氢键。因此，在活性上化合物Ⅳ对mglu5的拮抗活性远低于化合物Ⅰ。
3.8 化合物Ⅰ-Ⅳ对肝癌HepG2细胞增殖的影响
目标化合物Ⅰ-Ⅳ对肝癌细胞HepG2具不同程度的抗增殖活性，IC50值分别为2.55 μmol/L、3.99 μmol/L、3.12 μmol/L和7.55 μmol/L。目标化合物体外抗HepG2增殖实验结果与mglu5拮抗活性具有一定的正相关性，即化合物Ⅰ活性在4个目标化合物中抗增殖活性最强，化合物Ⅳ抗增殖活性最差。见表2。
4 结论
本课题组前期设计合成的水杨酰苯胺化合物Ⅰ-Ⅳ，通过与mglu5的活性口袋产生疏水作用以及与活性口袋关键氨基酸残基SER809产生氢键作用，从而拮抗mglu5，并对HepG2细胞增殖产生抑制，符合文献[2]报道的mglu5的表达与HepG2细胞增殖正相关这一规律。对接研究发现：水杨酰苯胺取代基的种类、个数以及取代位置对mglu5拮抗活性有较大影响，此结合模式提供的信息将为针对mglu5这一靶点设计抗肿瘤新化合物提供新方向。
参考文献：
[1] WIJETUNGE L S， TILL S M， GILLINGWATER T H， et al. mGluR5 regulates glutamate-dependent development of the mouse somatosensory cortex[J]. J Neurosci， 2008， 28(49)：13028-13037.
[2] WU Y L， WANG N N， GU L， et al. The suppressive effect of metabotropic glutamate receptor 5 (mGlu5) inhibition on hepatocarcinogenesis[J]. Biochimie， 2012， 94(11)：2366-2375.
[3] VARNEY M A， COSFORD N D， JACHEC C， et al. SIB-1757 and SIB-1893： selective， noncompetitive antagonists of metabotropic glutamate receptor type 5[J]. J Pharmacol Exp Ther， 1999， 290(1)：170-181.
[4] COSFORD N D， TEHRANI L， ROPPE J， et al. 3-[(2-Methyl-1，3-thiazol-4-yl)ethynyl]-pyridine： a potent and highly selective metabotropic glutamate subtype 5 receptor antagonist with anxiolytic activity[J]. J Med Chem， 2003，46(2)：204-206.
[5] FELTS A S， SALEH S A， LE U， et al. Discovery and SAR of 6-substituted-4-anilinoquinazolines as non-competitive antagonists of mGlu5[J]. Bioorg Med Chem Lett， 2009， 19(23)： 6623-6626.
[6] 傅榕賡，杨辰枝子，严建业，等.水杨酰苯胺类mglu5拮抗剂的设计、合成及活性研究[J].湖南中医药大学学报，2017，37(5)：489-492.
(本文编辑 苏 维), http://www.100md.com(张弦 周鑫 尹华 张昊霖 文菲 熊广华 曹德良 廖端芳 傅榕赓)