1 材料与方法

    1.1 实验动物 选择刚出生的SD大鼠，进行原代神经元细胞培养。

    1.2 方法

    1.2.1 原代神经元培养 选择刚出生的SD大鼠，用眼科镊取出海马，D-Hanks液清洗后，剪成1 mm3左右的小块，在37 ℃温度下用0.25%胰蛋白酶消化组织小块后，调节细胞悬液浓度为1×106/mL，接种于经0.01%多聚赖氨酸预处理的细胞培养瓶中。神经元细胞培养9 d后，经过NF-200免疫细胞组织化学法鉴定，神经元占培养细胞的90%以上。

    1.2.2 建立抗NMDA受体脑炎诱导的神经元损伤模型 当神经元细胞培养至第9天，随机选取60个标本为实验1组，15个样本为对照1组，将实验1组均分为4个小组，分别加入不同浓度谷氨酸(100、200、300、400 μmol/L)，对照1组不加任何药品处理，实验1组中不同浓度的谷氨酸与神经元细胞作用15 min后更换新鲜培养液，24 h后进行台盼蓝染色和TUNEL细胞凋亡检测。(1)台盼蓝染色检测细胞存活率：神经元细胞经台盼蓝染色后，随机计数15个视野中蓝染神经元数，死亡细胞被染成蓝色，未着色的细胞为存活细胞。神经元存活率=神经元存活数/细胞总数×100%。(2)TUNEL检测细胞凋亡率：神经元细胞经TUNEL检测，随机计数15个视野中深棕色神经元数，凋亡细胞被染成深棕色，未着色的细胞为存活细胞。神经元凋亡率=神经元凋亡数/细胞总数×100% ......